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中国农业科学院棉花研究所专利:耐盐相关基因剪切体的克隆、鉴定及其应用
耐盐相关 基因 剪切体 克隆鉴定
2024/4/22
旨在克隆绵羊 TGFβ2(Transforming growth factor-β2)基因CDS,解析其序列及编码蛋白的生物学特性,为绵羊生产利用提供理论基础。采用PCR技术克隆获得 TGFβ2 基因的CDS,并进行生物信息学分析。结果表明:绵羊 TGFβ2 基因的CDS长度为 1 329 bp,编码 442 个氨基酸;其可变剪切体 TGFβ2-AS1和 TGFβ2-AS2 由于CDS部分缺失分别...
一种新的人血管内皮生长因子基因的剪切体
血管内皮生长因子 可变剪切形式 逆转录聚合酶链反应
2012/6/28
目的探索人胚胎肺组织中是否存在一种新的血管内皮生长因子(VEGF)基因可变剪切形式。方法对1例4月龄引产胎儿肺组织的总RNA进行逆转录聚合酶链反应、克隆并测定扩增片段的序列。结果用一对引物(引物5’端-21~7 bp, 3’端554~576 bp)可扩增出3条片段,一条为长度正常的VEGF16(5 619 bp)全长序列,另一条为长度正常的VEGF12(1 487 bp)全长序列,第三条为新的VE...
目的: 克隆HBeAg结合蛋白未知功能新基因HBeBP4的剪切体基因HBeBP4A, 构建其真核表达载体, 并应用生物信息学初步探讨其结构及功能. 方法: 应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增HBeBP4基因的剪切体基因HBeBP4A, 选用pGEM-Teasy载体进行TA克隆, 通过PCR, 限制性酶切分析及测序进行鉴定, 再将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-Hi...
HCV p7蛋白反式调节新基因3及其剪切体克隆化和生物信息学分析
丙型肝炎病毒 剪切体 p7蛋白
2009/8/7
目的: 筛选HCV p7病毒蛋白反式调节的新靶基因p7TP3, 克隆p7TP3基因及其不同剪切体基因序列, 并进行功能分析, 探讨丙型肝炎病毒(HCV)p7病毒蛋白在HCV致病过程中的作用. 方法: 依据我们构建的真核表达载体pcDNA 3.1(-)-p7转染肝母细胞瘤细胞系HepG2, 提取总RNA, 逆转录为cDNA后进行基因表达谱芯片分析, 利用生物信息学技术获得新基因p7TP3及其可变剪切...
目的: 利用基因表达谱芯片技术筛选、比较丙型肝炎病毒NS5A反式调节基因2不同剪切体对HepG2细胞基因表达的调控作用及差异性.方法: 利用分子生物学技术和生物信息学技术相结合,克隆人NS5ATP2的不同剪切体蛋白的编码基因,常规分子生物学技术构建相应的真核细胞表达载体pcDNA3.1-NS5ATP2(615)和pcDNA3.1-NS5ATP2(216).脂质体技术转染肝母细胞瘤细胞系HepG2....
目的: HCV NS5A病毒蛋白反式激活作用的新的靶基因NS5ATP2及其不同剪接体基因序列的确立、克隆化研究. 方法: 依据我室构建的NS5A反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,利用生物信息学技术获得,提取HepG2细胞的总RNA,进行反转录(RT-PCR),扩增产物与原核表达载体连接,进行测序鉴定.结果: 经测序鉴定成功获得新基因的编码序列,并意外发现了NS5ATP2的不同剪接体,对NS5...
敬钊毒素-V剪切体Y1-JZTX-V的化学合成与氧化复性及钠通道活性研究
2007/12/17
应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化学合成了敬钊毒素-V分子N-端酪氨酸残基剪切体(Y1-JZTX-V),并且通过反相HPLC和质谱对不同条件下的氧化复性结果进行监测,从而摸索出该剪切体的最佳氧化复性条件为:0.1 mol/L Tris-Hcl缓冲液、pH 7.50、1 mmol/L GSH、0.1 mmol/L GSSG、样品浓度为0.05 mg/L、复性温度为4℃。膜片钳电生理实验结果显示敬钊...