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MTF-1对食管鳞癌EC109细胞株生长和迁移的影响
金属反应转录因子1 食管鳞癌 细胞增殖 细胞迁移
2014/5/20
研究外源性金属反应转录因子-1（metal-responsive transcription factor-1, MTF-1）对食管鳞癌EC109细胞的增殖、凋亡、迁移及细胞周期的影响，并探讨其作用机制。 方法 构建MTF-1真核表达载体pcDNA3.1-MTF-1，转染EC109细胞，采用RT-PCR和Western blot分别检测MTF-1 mRNA和蛋白水平的表达。采用...
慢病毒介导shRNA沉默HDAC1表达对EC109细胞生长特性的影响
HDAC1 慢病毒 食管癌细胞 细胞生长
2013/11/15
应用慢病毒介导的RNA干扰技术，有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。 方法 以HDAC1为靶基因，合成寡核苷酸，退火形成双链DNA，与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体；将其与病毒复制包装质粒共感染293T细胞，收集并浓缩上清液获得重组病毒，测定病毒滴度；病毒颗粒转染EC109细胞，通过荧光显微镜等观...
探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1（ATP-binding cassette protein E1, ABCE1 ）基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法：合成靶向 ABCE1 的siRNA序列（ABCE1-siRNA）以及阴性对照序列（NC-siRNA），电转法转染至EC109细胞，分别形成ABCE1-EC109、NC-siRNA-EC109细胞。RT-PCR、W...
探讨靶向葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78， GRP78 ）基因的miRNA真核表达质粒，对人食管癌EC109细胞增殖的影响。 方法： 设计合成4对针对 GRP78 的特异性miRNA干扰序列和1对阴性对照序列，定向克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上，构建靶向 GRP78 的miRNA重组质粒：pcDNATM6.2-miR7...
环巴胺对人食管癌EC109细胞转移的影响及作用机制
Hedgehog通路 环巴胺 EC109细胞系 转移
2013/1/4
目的探讨环巴胺特异性阻断人食管癌EC109细胞Hedgehog（Hh）信号通路后对其转移能力的影响及其可能的机制。方法环巴胺处理EC109细胞48h后，采用Transwell小室、血管生成实验观察细胞的迁移、侵袭及血管形成等转移能力，RT-PCR检测Gli-1mRNA的表达，Western blot检测Gli-1、MMP-9、VEGF蛋白的表达。结果环巴胺阻断Hh信号通路能显著减弱EC109细胞迁...
探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌EC109细胞凋亡中的作用。方法 腺苷2 mmol·L-1作用于EC109细胞24～72 h或腺苷0.5～4 mmol·L-1作用于EC109细胞36 h，MTT法观察腺苷对EC109细胞存活率的时效和量效关系；免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78），胱天蛋白酶4，胱天蛋白酶3，转录因子CHOP和核因子κB (NF-κB)的表达及亚细胞定位；原位末端转移酶...
亚砷酸诱导人食管癌细胞株EC109细胞p15INK4B基因的表达
亚砷酸 p15INK4B 甲基化 食管癌
2009/8/14
目的: 研究亚砷酸(As2O3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15INK4B (p15)基因表达的影响. 方法: 终浓度2 mumol/L的As2O3加入食管癌EC109细胞系, 采用甲基化特异PCR (MSP)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化, 采用RT-PCR和Western blot方法检测As2O3处理前后p15的mRNA和蛋白质水平的表达情况. 用...
目的: 探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响. 方法: 根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组，空载体转染组，未转染组.应用PCR检测外源性p15基因，Western blot方法检测转染细胞的P15蛋白变化;流式细胞仪分析细胞周期变化，应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响...
白藜芦醇对人食管癌EC109细胞的生长抑制及诱导凋亡作用
白藜芦醇 食管癌细胞 生长抑制 凋亡
2008/10/24
背景与目的： 探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)抑制人食管癌EC109细胞生长、诱导凋亡的作用机制。 材料与方法: 不同浓度Res作用EC109细胞后，采用MTT法检测Res对人食管癌EC109细胞生长的抑制作用;Hoechst33258荧光染色和倒置相差显微镜观察EC109细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期分布和细胞凋亡。 结果： Res(15.62～500 μmol/L)可以...