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人肺癌细胞系A549中肿瘤干细胞样细胞的分离及鉴定
肺癌 肿瘤干细胞 细胞球
2012/7/10
从人肺癌细胞系A549中分离并鉴定肺癌干细胞。 方法 将A549细胞置于无血清条件培养基中培养,形成细胞球,采用平皿克隆形成实验、MTT细胞增殖实验、RT-PCR、Western blot、免疫荧光技术,检测并比较A549细胞和A549细胞球的增殖能力及干细胞相关标记的表达水平,鉴定细胞球的肿瘤干细胞特性。 结果 利用无血清条件培养基从A549细胞中分离出肿...
探讨斑蝥酸钠联合多西紫杉醇抑制人肺腺癌A549细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,初步探讨其作用机制。方法 采用MTT法测定细胞增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞仪测定细胞凋亡率;Western印迹法测定Caspase-8活性。结果 斑蝥酸钠和多西紫杉醇均能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖(P<0.05),合用与单用相比抑制率明显提高,诱导12 h时CI值为0.88,24 h时为...
研究自噬对吉西他滨(gemcitabine,GEM)诱导的肺癌细胞A549凋亡的影响并探讨其可能机制。方法:MDC染色后采用荧光显微镜对自噬进行形态观察;以CCK8检测3-MA抑制自噬前后经吉西他滨诱导的A549细胞存活率;RT-PCR检测自噬相关基因Beclin-1表达的变化。Western blot分别检测自噬相关性蛋白Beclin-1及凋亡活化蛋白Caspase-3的变化。结果:吉西他滨可诱...
研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor, EGFR-TKI)吉非替尼联合环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用及其可能机制。 方法: 实验设空白对照组、吉非替尼组、塞来昔布组、吉非替尼+塞来昔布组。倒置相差显微镜下...
贝伐单抗抑制人非小细胞肺癌A549-luc细胞裸鼠移植瘤的生长及浸润
生物发光成像技术 贝伐单抗 非小细胞肺癌 肿瘤浸润
2014/3/24
探讨贝伐单抗(bevacizumab)对人非小细胞肺癌A549-luc细胞小鼠移植瘤生长、浸润的影响。 方法: 将稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞系A549-Luc接种于裸鼠皮下,成瘤后随机分为对照组、低剂量贝伐单抗组及高剂量贝伐单抗组。对移植瘤进行生物发光成像,并与体积测量结果拟合;检测移植瘤质量和体积,计算贝伐单抗的抑瘤率。 结果: 生物发光成像观察结果显示,贝伐单抗组移植瘤发光区域和荧光强度较对...
研究肺腺癌中与耐药相关的泛素化或类泛素化蛋白质及其与耐药的关系。 方法 从经顺铂处理和未处理的A549细胞及其耐顺铂细胞株中分离泛素化、类泛素化蛋白质,通过1D SDS-PAGE和Chip HPLC-MS/MS分析鉴别蛋白,Western blot法验证质谱结果;MTT法检测细胞对顺铂的耐药性。 结果 鉴定出发生类泛素化修饰蛋白质-PKM2,并发现其在耐...
探讨靶向切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)和鸦胆子油乳联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。 方法: 设计并合成针对ERCC1基因对应序列的siRNA,采用转染试剂Lipofectamine 2000转染人肺腺癌耐药细胞A549/DDP;将实验组细胞分为:空白对照组、鸦胆子油处理组、siRNA处理组及鸦胆子...
前炎症因子白细胞介素23(interleukin 23, IL-23)是与慢性炎症和肿瘤微环境相关的一种重要的细胞因子,同时IL-23受体在结直肠癌、肺癌、口腔鳞癌等肿瘤细胞中有表达。本研究旨在探讨IL-23能否促进人肺腺癌细胞A549的迁移和侵袭并探讨其机制。方法 用划痕试验和Transwell小室法测定IL-23对A549的迁移和侵袭的影响,用Real-time PCR和ELISA检测IL-2...
肿瘤坏死因子-α对人肺癌A549细胞的放疗增敏作用
肿瘤坏死因子-α 肺癌 放疗增敏
2012/4/24
目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在人肺癌A549 细胞放射治疗中的增敏作用。方法单独γ射线辐照细胞或联合应用TNF-α处理细胞,通过MTT法检测人肺癌A549细胞存活生长曲线,采用流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期的变化,并利用Western blot 法分析细胞中Caspase-3蛋白表达的变化。结果与单独γ射线作用相比,TNF-α和γ射线联合应用能明显抑制人
肺癌A549细胞的生长,...
鸡血藤黄酮类有效部位对人肺腺癌A549细胞氧化应激的影响
鸡血藤黄酮类有效部位 活性氧 氧化应激 A549细胞
2012/4/10
探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺腺癌A549 细胞的杀伤活性与氧化应激反应的相关性。 方法: 实验分为SSCE高、中、低剂量组和正常对照组,各组分别加入不同浓度的SSCE(正常组用培养基代替)作用人肺腺癌A549 细胞24 h后,采用脂质过氧化物(MDA)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测A549细胞 MDA,GSH的含量;以2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针,用荧光...
利用小分子RNA干扰沉默碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因的表达,探讨其对肺腺癌A549细胞Oct-4表达、细胞增殖和凋亡的影响。方法 将A549细胞分为转染干扰质粒组(干扰质粒组)、转染阴性对照质粒组(阴性对照组)和未转染质粒组(空白对照组)。采用Real-Time PCR检测质粒干扰后A549细胞bFGF基因mRNA表达的变化; Western Blot检测Oct-4蛋白表达的变化;...
Glu-GNPs对人肺腺癌细胞株A549放射增敏的初步探讨
纳米金 A549细胞 放射敏感性 细胞凋亡
2012/5/3
探讨偶联葡萄糖的纳米金颗粒(GluGNPs)对人A549细胞的放射增敏作用及其机制。方法 噻唑蓝(MTT)法检测低浓度(≤20nmol/L)Glu-GNPs联合放射对A549细胞存活的影响,克隆形成检测Glu-GNPs对A549细胞的放射增敏作用,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及其凋亡。结果 低浓度GluGNPs对A549细胞生长无明显抑制,联合X射线后具有抑制作用,在15nmol/...
活性氧在荆花牡荆素诱导人肺癌A549细胞凋亡中的作用
肺肿瘤 细胞凋亡 活性氧 紫花牡荆素
2012/3/27
探讨紫花牡荆素(CAS)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及其机制。方法 体外培养A549细胞。MTT法测定CAS对A549细胞增殖的抑制;Annexin V/PI双染色分析细胞凋亡率;H2DCFH-DA探针流式细胞术分析活性氧(ROS)生成。结果 CAS能抑制人肺癌A549细胞增殖,呈浓度依赖性。Annexin V/PI法检测结果显示10 μmol/L的CAS作用A549细胞12 h、24 h、48 ...
探讨靶向B7-H4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外化学合成B7-H4特异性siRNA(B7-H4-siRNA),转染A549细胞,MTT法、流式细胞术、Western blotting分别检测A549细胞的增殖、细胞周期,以及B7-H4和Cyclin D1蛋白的水平;Transwell实验检测A5...