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Prohibitin 表达及对乳腺癌细胞系MCF-7 抑制生长的机制研究
抗增殖蛋白 乳腺癌 增殖 凋亡
2021/3/17
该研究从细胞水平研究了抗增殖蛋白(prohibitin)高表达在乳腺癌细胞中的生物学功能,并研究其抑制 MCF-7 生长的分子机制。方法 使用基因重组法构建pEGFP-PHB 重组质粒,脂质体瞬时转染乳腺癌细胞系MCF-7, real time-PCR 和Western Blotting 验证其高表达后,检测细胞生物学功能。包括:MTT(噻唑蓝)法检测细胞生长、流 式细胞仪检测细胞周期与凋亡、肿瘤...
乳腺癌MCF-7细胞中LncRNA XIST的表达及功能研究
LncRNA XIST 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭
2020/7/7
探讨lncRNA XIST在乳腺癌MCF-7细胞中的表达及其对MCF-7细胞功能的影响。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌MCF-7细胞中XIST的表达水平;利用瞬时转染技术在MCF-7细胞中过表达XIST,MTT法和Transwell小室法检测XIST过表达后MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化情况;生物信息学预测并用qRT-PCR检测与XIST有潜在结合位点...
研究黄酮化合物Alopecurone B(APB)对人乳腺癌细胞阿霉素耐药株MCF-7/ADR多药耐药的逆转活性及逆转机制。方法 人乳腺癌细胞阿霉素耐药株MCF-7/ADR维持在含有250 ng/mL阿霉素的培养基中,使用MTT法、qPCR、Western blot和流式细胞术研究APB对耐药株P-糖蛋白(P-gp)功能和表达的影响。
丙泊酚对乳腺癌MCF-7细胞CXCR4/CXCR7表达和体外迁移的影响
丙泊酚 乳腺癌 CXCR4/CXCR7 细胞迁移
2020/9/16
探讨丙泊酚对人乳腺癌MCF-7细胞CXC趋化因子受体(CXCR)4/CXCR7的表达及其对MCF-7细胞体外迁移能力的影响。方法:人乳腺癌MCF-7细胞随机分为对照组、脂肪乳组、丙泊酚3 mg/L组和丙泊酚8 mg/L组。用划痕实验和Transwell小室趋化实验测定细胞的迁移能力;采用RT-qPCR法测MCF-7细胞CXCR4/CXCR7的mRNA表达水平;采用Western blot法测定MC...
探究mRNA稳定因子人抗原R(humanantigenR,HuR)通过细胞周期特异性蛋白D1(cyclinD1)对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、凋亡和迁移等生命活动的影响。方法将MCF-7细胞分为对照组、HuR过表达组(构建HuR过表达载体并转染)、HuR敲低组(构建HuR敲低载体并转染)。各组细胞分别进行MTT检测细胞增殖活性;AnnexinV-APC/7-AAD双染检测细胞凋亡;Transwe...
p,p′-DDT对乳腺癌细胞MCF-7黏附能力及黏附分子的影响
p,p′-DDT MCF-7 细胞间黏附 细胞与基质间黏附
2020/12/11
探讨有机氯残留物有效成分p,p′-DDT对乳腺癌细胞MCF-7黏附能力及黏附分子的影响。方法将10-7mol/L的p,p′-DDT作用于MCF-748h后,分别采用细胞聚集试验和结晶紫染色法分析其对MCF-7细胞间黏附率和细胞与基质间黏附率的影响,并采用RT-qPCR法和Westernblot法检测MCF-7中钙黏附蛋白E(E-cadherin)和CD29mRNA和蛋白表达水平。
探讨色胺酮对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖作用及对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法 将人乳腺癌MCF-7细胞进行体外培养,采用不同浓度色胺酮(0.1,0.5,1,5,10,25,50,100 μmol·L-1)和ERK,p38MAPK,JNK通路抑制剂处理MCF-7细胞24,48,72 h,MTT法检测细胞增殖活性,...
探讨人乳腺癌细胞系MCF-7中高表达Twist基因对MCF-7干细胞特性细胞的影响。 方法 构建重组质粒pBABE-puro-myc-Twist,HEK293T细胞包装逆转录病毒,并感染MCF-7细胞,通过筛选获得成功转入Twist的MCF-7/Twist细胞和MCF-7/Vector对照细胞,再通过长程无血清悬浮培养方法富集具有干细胞特性的乳腺细胞小球(Mammosphere...
S100p促进乳腺癌MCF-7细胞他莫西芬耐受和细胞迁移
乳腺肿瘤 他莫昔芬耐受 迁移
2014/9/26
采用基因芯片技术检测乳腺癌MCF-7细胞系他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)耐受的差异表达基因,探讨S100p对MCF-7细胞TAM耐受和细胞迁移能力的影响。 方法 提取MCF-7和耐药型MCF-7(简称MCF-7R)细胞系总RNA,应用安捷伦(Agilent)基因芯片检测二者差异表达基因。随机选取差异表达基因,应用实时定量PCR(qRT-PCR)技术验证;基因干扰...
探讨人硫酸酯酶-1(human sulfatase 1,hSulf-1)基因过表达是否提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性。方法:采用不同浓度AZD2281处理细胞,并筛选AZD2281处理的最佳浓度。将携hSulf-1基因的重组腺病毒Ad5-hSulf1感染MCF-7细胞,以Ad-hSulf1和AZD2281单独或联合处理MCF-7细胞,以Ad5-EGFP处理为对照。采...
构建p70 核糖体蛋白S6激酶1(p70 ribosomal protein S6 kinase 1,p70 S6K1)及p85 S6K1基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,并鉴定其在人乳腺癌MCF-7细胞内的表达及功能。 方法: 以pRK7-HA-S6K1为模板,采用PCR扩增出目的基因片段p70 S6K1、p...
构建靶向端粒酶逆转录酶(telomerose reverse transcriptas,TERT)的热激蛋白(heat shock protein,HSP)70B′启动子调控的热诱导型RNAi表达载体,观察热诱导条件下其在人乳腺癌MCF-7细胞内的RNAi效应及其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。 方法: PCR扩增 HSP70B′ 启动子序列,用其构建热诱导型靶向TERT的重组载体并转染MCF-...
辛伐他汀抑制人乳腺癌MCF-7细胞内多能干细胞标志物Oct3/4 Nanog和Sox-2表达
辛伐他汀 乳腺癌 MCF-7细胞 多能干细胞标志物 Oct3/4 Nanog Sox- 2
2014/5/14
研究辛伐他汀(simvastatin ,SIM)对人乳腺癌MCF-7 细胞内多能干细胞标志物Oct3/4、Nanog和Sox- 2 表达的影响。方法:应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术、免疫荧光染色方法,流式细胞仪和免疫印迹(Western blot)方法检测SIM 对MCF-7 细胞内多能干细胞标志物表达的影响。结果:qRT-PCR结果显示,10、50和100 μmol/L S...
甘草素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及自噬的影响
乳腺肿瘤 甘草素 细胞凋亡 自噬
2014/4/29
观察甘草素对人乳腺癌MCF-7细胞生长、凋亡及自噬的作用。方法:不同浓度(0.05,0.10,0.20,0.40 mmol/L)的甘草素处理MCF-7细胞24,48,72 h后,采用MTT比色法测定细胞存活率。以上浓度的甘草素处理MCF-7细胞48 h后,用Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡情况,用吖啶橙(AO)染色,观察细胞自噬。结果: 随着甘草素浓度的增加及作用时间的延长,MCF-7细胞的存...
RNAi沉默MACC1基因表达抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移
结肠癌转移相关基因1 小干扰RNA MCF-7 细胞增殖 细胞迁移
2013/11/13
探讨RNAi沉默MACC1基因表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移的影响及相关的分子机制。 方法 化学合成针对MACC1基因的荧光标记的siRNA-FAM,利用 siRNA 转染试剂将MACC1特异性siRNA-FAM转染至乳腺癌MCF-7细胞;采用RT-PCR检测siRNA 对MACC1 mRNA表达的影响,Western blot检测siRNA对MACC1蛋白合成的影响;M...