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北京理工大学题组在siRNA功能化镧系纳米材料抗肿瘤研究方面取得进展（图）
黄渊余 纳米材料 抗肿瘤治疗
2022/7/12
近日，北京理工大学黄渊余课题组在siRNA功能化镧系纳米材料抗肿瘤治疗方面取得重要研究进展，相关成果以“siRNA-functionalized lanthanide nanoparticle enables efficient endosomal escape and cancer treatment”为题发表在Nano Research(中科院一区，IF=10.269)。该工作第一作者为北京理...
纳米载体在共负载siRNA及化疗药物对逆转肿瘤多药耐药性方面的应用
RNA干扰技术 基因调控 逆转多药耐药性 纳米载体
2022/3/31
近年来,基于小干扰RNA(siRNA)的基因干扰技术从基因水平上调节与肿瘤产生多药耐药性相关的各种蛋白进而逆转化疗多药耐药性方面表现出了巨大的应用潜力。鉴于此,研究者们在RNA干扰与化疗药物的协同抗癌方面做了大量工作。但游离的siRNA在无载体的情况下不易被细胞吸收,而且会被血浆和组织中内源性的核糖核酸酶降解,因此必须将siRNA负载在载体上才能有效应用于肿瘤治疗。鉴于纳米载体的安全、高效及靶向性...
靶向肽在递送siRNA进行肺癌治疗研究中的应用
肺肿瘤 靶向肽 siRNA
2014/9/29
肺癌被认为是全球发病率最高的一种恶性肿瘤，其对化疗药物不敏感且易产生耐药性，因此增强肺癌药物治疗效果是近年来研究的热点。siRNA是一种小RNA分子，可以沉默与之互补的目标mRNA，是一种基因治疗手段。靶向肽是一类小分子多肽，它可以与siRNA联合使用，利用其与肿瘤表面物质特异性结合发挥靶向作用。联合靶向肽的特异性和siRNA的治疗作用，增加siRNA在靶点位置的聚集，增强沉默效果，可以提高肺癌对...
U6/H1双启动子siRNA表达框架构建及其对肿瘤细胞端粒酶活性的干扰作用
末端转移酶 RNA干扰 启动区（遗传学）
2014/10/31
构建针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子siRNA表达框架（SEC），并观察其转录产物对HeLa细胞端粒酶活性的干扰作用。 方法：利用融合PCR技术，针对人端粒酶hTERT基因开放阅读区构建3条U6/H1双启动子SEC以及针对其3'端非翻译区构建1条U6/H1双启动子SEC，对各SEC鉴定后，分别转染人宫颈癌HeLa细胞，用端粒重复序列扩增法（TRAP）检测HeLa细胞的端粒酶活性。 结果...
探讨mTOR蛋白与宫颈癌发生、发展过程的相关性及雷帕霉素和mTOR siRNA对宫颈癌细胞中mTOR、4EBP1表达的影响。方法 应用免疫组织化学方法检测正常宫颈鳞状上皮组织、CIN组织和宫颈癌组织中mTOR蛋白的表达情况；应用RNAi技术及雷帕霉素分别处理宫颈癌HeLa细胞，运用原位杂交、免疫细胞化学技术分别检测处理前后HeLa细胞中mTOR、4EBP1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 mTOR...
构建3TAT-DRBD重组载体，表达和纯化融合蛋白，并对其siRNA结合活性和穿膜功能进行初步验证。 方法： 采用基因合成技术获取靶基因 3TAT-DRBD， 并克隆到原核表达载体pET-44b中；用IPTG诱导融合蛋白表达，镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白，凝血酶切除标签，Western blotting鉴定。凝胶迁移阻滞实验验证DRBD和siRNA的结合能力，激光共聚焦显微镜观察TAT的穿膜能力。...
探讨体外沉默 CCL18 基因的表达对卵巢上皮癌SKOV3细胞侵袭和迁移的影响。 方法： 化学合成3对靶向 CCL18 的siRNA（CCL18-siRNA61、CCL18-siRNA127、 CCL18-siRNA224），体外转染至CCL18阳性的SKOV3 细胞，RT-PCR检测SKOV3 细胞中 CCL18 mRNA的表达，选取其中干扰效率最好的序列，构建靶向 CCL18 的干扰质粒pSi...
去端肽胶原介导递送siRNA联合顺铂治疗前列腺癌的研究
RNA干扰 前列腺癌 去端肽胶原 顺铂
2013/12/20
通过去端肽胶原向异体移植肿瘤递送siRNA，探讨去端肽胶原介导法联合顺铂在前列腺癌中的疗效及安全性。
siRNA沉默livin的表达对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及侵袭的影响
结肠癌 livin 小干扰RNA 基因治疗
2014/3/24
探讨小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）沉默人结肠癌HT-29细胞livin表达对HT-29细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。 方法： 合成靶向livin的双链siRNA（livin-siRNA），转染HT-29细胞，RT-PCR及Western blotting检测HT-29细胞中livin mRNA及蛋白的表达，MTT实验检测HT-29细胞的增殖，流式细胞术检测H...
EGFRvⅢ的siRNA对胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响
表皮生长因子Ⅲ型突变体 RNA干扰 胶质瘤 U87
2013/12/26
研究EGFRvⅢ的siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞中EGFRvⅢ的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响。 方法化学方法合成特异针对EGFRvⅢ的siRNA，转染U87-EGFRvⅢ细胞后，利用半定量RT-PCR法检测细胞中EGFRvⅢ的mRNA表达，采用蛋白印迹法和免疫荧光法检测细胞中EGFRvⅢ的蛋白表达水平，MTT法检测siRNA对胶质瘤细胞增殖的作用，Annexin V-FITC/PI法...
慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达的实验
血管内皮生长因子C RNA干扰 慢病毒载体 MCF-7
2013/12/27
研究慢病毒载体介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞系VEGF-C表达的敲减作用。方法构建慢病毒VEGF-C/siRNA载体，转染乳腺癌MCF-7细胞，采用Real-time PCR检测MCF-7细胞在转染前后VEGF-C的mRNA表达，计算其转染效率和VEGF-C敲减率。结果慢病毒VEGF-C/siRNA转染效率超过80%，其VEGF-C的mRNA表达敲减率达50%。结论慢病毒VEGF-C/si...
siRNA抑制FHL2对胃肠癌细胞β-catenin活性的影响
fhl2 β-catenin survivin 肠癌
2013/12/30
本研究旨在调查通过siRNA抑制FHL2表达后对β-catenin活性及其下游基因survivin表达的影响，探讨两者在肠癌发生中的协同作用。方法 (1)PCR扩增含有β-catenin作用位点、长为340bp的survivin基因启动子片段，克隆入PGL3-basic载体，构建荧光素酶报告质粒pluc340。(2)脂质体瞬时转染法将β-catenin活性报告质粒pTOPFLASH、pFOPFLA...
研究siRNA干扰X连锁凋亡抑制蛋白（X linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP）基因表达对结肠癌细胞LoVo体内外增殖的影响。方法：构建XIAP真核表达干扰载体pSil2.1 shXIAP1和pSil2.1 shXIAP2，脂质体转染结肠癌细胞株LoVo，G418筛选出稳定转染LoVo shXIAP2细胞。RT PCR和Western bl...
Fas siRNA真核表达载体构建及其抑制Jurkat细胞凋亡的作用
siRNA Fas 真核表达载体 细胞凋亡
2013/12/30
构建Fas（CD95）特异性siRNA真核表达载体psilencircle-FasSi，转染Fas-FasL凋亡敏感细胞株Jurkat，研究其抗凋亡作用。方法 通过聚合酶链式反应（PCR）制备siRNA表达框架(SECs)，转染Jurkat细胞，实时荧光定量PCR检测Fas mRNA抑制率，筛选出高效抑制Fas mRNA表达的siRNA；把筛选出的siRNA序列插入siRNA真核表达质粒psile...