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用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
差异显示反转录PCR 银染 拟南芥 ast突变型
2008/6/12
通过调整差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量，优化了适用于银染检测的DDRT-PCR方法.PCR扩增产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后，银染能检测到多而清晰的条带.泳道中的条带数最少为40个，最多达80个，平均为60个，条带大小分布在100～900 bp范围，灵敏度为5 pg/mm2 .此方法操作简便快速，灵敏度...
摘要基因扩增是介导细胞产生耐药性的一种普遍性机制。为探讨MTX耐药的小鼠细胞中与耐药机制形成有关的分子遗传学背景，应用差异PCR技术，检测了MTX耐药细胞中DHFR基因的扩增和过表达，并对myc及p53基因状态与dhfr扩增之间的相关性进行了探讨。结果表明：dhfr的扩增和过表达直接介导细胞耐药。未检测到c-myc的扩增和p53拷贝数的变化；也未检测到c-myc mRNA水平的改变,但p53基因的...
用复合PCR检测DXS7132和DXS6804的单倍型
短串联重复序列 X染色体 遗传多态性 亲权鉴定
2008/1/26
摘要建立X染色体短串联重复基因座DXS7132和DXS6804的复合扩增系统，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术进行分型，调查广东汉族人群该二基因座的多态性。结果发现DXS7132有7个等位基因，扩增产物的长度在276~300bp；DXS6804有6个等位基因，扩增产物的长度在177~201bp。序列分析揭示这两个基因座的重复单位均为四核苷酸重复。由于基因组作图信息显示DXS7132和DXS6804...
用PCR检测恶性纤维组织细胞瘤体DNA的变化1)
PCR 恶性纤维组织 细胞瘤体 DNA
2008/1/15
为了进一步探讨恶性纤维组织细胞瘤的癌变机理，作者采用聚合酶链反应PCR对该肿瘤患者的瘤细胞和淋巴细胞DNA进行了配对扩增实验。如果来自同一个体的两种组织的DNA序列完全一致，经聚合酶链反应扩增后的DNA片段大小应完全相同，如果经扩增后的片段大小不一致或有片段的丢失增加，则提示DNA序列有改变。
改良DDRT-PCR研究苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因
DDRT PCR cell differentiation matrine gene expression leukemia
2007/12/21
The differentiation of human leukemia K562 cells can be induced by matrine. To investigate the mechanism of the induced cell differentiation, an improved DDRT PCR technique was applied to screen the d...
摘要 转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞与有血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞以及去血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｐ细胞基因表达的差异．克隆了数个特异或差异表达的短ｃＤＮＡ片段，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实其中两个片段Ｌ...
用多引物PCR分析γ射线引起人外周血淋巴细胞hprt基因突变
γ射线照射 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 多引物ＰＣＲ 基因突变
2007/12/18
摘要 正常人外周血用~（６０）Ｃｏ射线分别进行１～８Ｇｙ照射后，在含６－ＴＧ的培养基上克隆和筛选人淋巴细胞ｈｐｒｔ突变细胞。细胞的突变频率与γ射线的照射剂量呈正相关．获得４２个ｈｐｒｔ突变细胞株，用８对ｈｐｒｔ寡核苷酸引物进行多聚酶链反应（ＰＣＲ）从细胞粗提物中分别扩增ｈｐｒｔ各个外显子，分析突变细胞的ｈｐｒｔ基因突变，约６０％（２５／４２）的ｈｐｒｔ基因突变为基因缺失，其中１３个突变是ｈｐｒｔ基...
促髓细胞分化的锌指基因单向PCR扩增直接测序的研究
髓细胞锌指基因（ＭＺＦ－１） 单向ＰＣＲ ＤＮＡ直接测序
2007/12/17
摘要 锌指基因是一种造血调节基因，编码锌指结构蛋白，主要在髓细胞中表达，促进髓细胞分化，在急性早幼粒白血病维甲酸治疗中，促使病情缓解。本文报道了我们从基因分子上研究锌指基因作用中，探索并建立了单向聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增特定单链ＤＮＡ，直接测序的新方法。它能产生质和量均佳的单链ＤＮＡ，无需纯化即可直接用于测序，使复杂的测序研究简便易行，可在２，３天内完成。这种单向ＰＣＲ扩增特定单链ＤＮＡ直接测序...
题目：用低G／C％含量引物通过PCR扩增家蝇细胞色素P—450 cDNA
作者：康巧华 陈年春 周顺伍 齐顺章
摘要：根据昆虫细胞色素P-450基因的多型性和遗传多态性，以苯巴比妥钠诱导、室内饲养的杀虫剂敏感种群雌性家蝇Musca omestica vicina Macquart为材料，提取总RNA，以0ligo(dT)-纤维素亲和层析分离出总mRNA；以此为模板反转录合成总cDNA。再以...
期刊信息
篇名
新疆布顿大麦（Hordeum bogdanii Wilensky）叶绿体基因组PCR-RFLP分析.
语种
中文
撰写或编译
撰写
作者
魏育明,郭红,颜泽洪,吴卫,张志清,刘登才,郑有良
第一作者单位
四川农业大学小麦研究所
刊物名称
西南农业学报
页面
18(2): 117-121, 2005
出版日期
2005年
6月
日
文章标识(ISSN)
相关项目
促进远缘杂交种子发育...