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该文通过Tet调控下共表达PDX1与BTC的骨髓间充质干细胞系(PDX1+BTC+MSCs),探讨PDX1和BTC共表达对骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的效率及成熟度的影响。采用两步法对PDX1+BTC+MSCs细胞系诱导分化成IPCs, 第一步Dox诱导7天检测到Nestin、CK19表达; 第二步再诱导7天后形成DTZ染色阳性的胰岛样结构, Ngn3、Nkx6.1 mRNA水...
目的:应用分子生物学技术,构建胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)和神经分化因子1(NeuroD1)转录因子真核表达质粒,检测其能否在真核细胞中有效表达并诱导人肝细胞转分化的能力。方法:以人胚胎胰腺组织mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1和NeuroD1基因,分别克隆到真核双表达载体pIRES质粒的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建pI/Pdx1/NeuroD1真核表达质粒,...