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多头带绦虫Tm7基因的表达及间接ELISA检测方法的建立
脑多头蚴 重组抗原 Tm7 间接ELISA
2013/12/3
以多头带绦虫Tm7重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病早期诊断方法。本研究从羊脑多头蚴原头节提取总RNA,采用RT-PCR技术首次扩增出Tm7基因的全序列,该基因的开放阅读框为207 bp,编码68个氨基酸。将此基因克隆到pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a-Tm7,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。以纯...
Comparison of ELISA and Three Rapid HCG Dipsticks in Diagnosis of Premature Rupture of Membranes
Premature rupture of membranes Human chorionic gonadotropin
2015/9/23
Background: The importance of accurate diagnosis of premature rupture of membranes (PROM) is quite apparent while trying to diminish false negative or positive results as much as possible. This study ...
内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用
内毒素 多克隆抗体 酶联免疫吸附试验(ELISA)
2014/8/12
制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法 大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应。结果 随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1:6 400;在包被抗原浓度100μg/mL和兔多抗稀释比1:500最佳使用条件下...
在多克隆抗体的基础上研制一种用于检测动物源性食品中磺胺二甲嘧啶(SMZ)残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证。将磺胺二甲嘧啶添加到猪肝、猪肉和鸡肉样品中,用所制备的试剂盒和HPLC分析方法检测样品中的磺胺二甲嘧啶残留,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。研究结果表明,磺胺二甲嘧啶浓度在0.5~50 ng·mL...
新霉素阻断ELISA试剂盒的研制与应用
新霉素 单克隆抗体 阻断ELISA 试剂盒
2013/12/3
本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒。以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 3 ;检测范围为1.0~64.0 μg·L1,半数抑制浓度(IC50)为2....
猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达及在ELISA中的初步应用
圆环病毒2型 Cap蛋白 间接ELISA
2013/12/3
本研究旨在建立以PCV2 Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET32aORF2并转化至Rosetta菌,在1.0 mmol·L-1 IPTG和37 ℃条件下诱导下,Cap蛋白获得高效表达,Western blot检测证实其具有免疫反应活性,以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果表明抗原最适包被浓...
Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌
嗜水气单胞菌 胞外蛋白酶 斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA) 检测
2013/12/3
在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16S rRNA基因检测72株气单胞菌分离株。结果显示致病性嗜水气单胞菌检测阳性率分别如下:DotELISA法90.3%(65/72)、脱脂奶平板法75%(54/...
探讨rSj26-Sj32融合蛋白对慢性日本血吸虫病患者的诊断价值。 方法 分别用rSj26-Sj32融合蛋白和日本血吸虫成虫抗原(SjAWA)作为包被抗原, 采用Dot-ELISA检测慢性日本血吸虫病患者(40例)血清IgG, 同时以华支睾吸虫病(21例)、 卫氏并殖吸虫病(13例)、 泡型棘球蚴病(10例)、 囊型棘球蚴病(9例)、 乙型肝炎(20例)和肺结核患者(20例)及健康人(43例)血...
肾综合征出血热IMMS-ELISA检测方法建立
肾综合征出血热 汉坦病毒 免疫磁性微球 酶联免疫吸附测定
2014/7/28
建立一种用于检测肾综合征出血热(HFRS)特异性抗体IgG的ELISA方法—免疫磁性微球(IMMS)ELISA。方法 利用重组菌株E.coli BL21(DE3)/pET32a-L99S诱导表达SEO型汉坦病毒(HV)重组核蛋白(rNP),并进行镍亲和层析纯化,以纯化rNP为抗原,分别建立检测HFRS特异性抗体IgG的3种ELISA法:间接ELISA、捕获ELISA和IMMS-ELISA,并进行方...
The popularity of phytoestrogen food supplements of plant origin steadily increases. They are used to solve the problems related to the climacterium. Their efficiency depends on woman's capability to ...
Evidence for wheat, rye, and barley presence in gluten free foods by PCR method – comparison with ELISA method
polymerase chain reaction ELISA wheat rye barley gliadin
2014/2/26
A method of the evidence for the presence of wheat, rye, and barley in gluten free foods, based on the polymerase chain reaction (PCR), was validated. DNA was isolated from foods by chaotropic solid p...
Comparison of the results of the ELISA, histochemical, and immunohistochemical detection of soya proteins in meat products
ELISA allergen immunochemistry immunohistochemistry histochemistry
2014/2/25
This work compares the commonly used immunochemical methods for soya protein detection and alternative microscopic methods. Immunochemical methods were represented by the competitive ELISA method. His...
猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本试验旨在研究分泌核酸酶基因(SsnA)作为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用。作者以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增SsnA基因片段,将该片段克隆到表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大...
牛病毒性腹泻病病毒NS3表位串联蛋白表达及抗体间接ELISA方法的建立
BVDV NS3蛋白 表位串联 间接ELISA
2013/12/3
为建立一种有效的牛病毒性腹泻病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗体检测方法,作者将BVDV NS3蛋白2个抗原表位的编码核酸序列进行串联,构建重组表达载体pET30aEXnN,并在原核表达系统中表达了重组蛋白。选取包含12个表位肽的重组蛋白(rBVDVEX6N)作为包被抗原建立NS3蛋白抗体间接ELISA方法。该方法的特异性和稳定性良好,与2种商品化...