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Survivin shRNA重组慢病毒构建
及对A549细胞增殖的影响
慢病毒 Survivin 短发夹RNA 增殖
2013/12/5
Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein, IAP）家族的成员，在多种肿瘤组织中高度表达而在终末分化细胞中极少表达，因此可以作为癌症治疗的理想靶点。本研究旨在通过构建Survivin基因shRNA的慢病毒质粒并干扰肺癌细胞A549中Survivin的表达，分析其对细胞增殖的影响。方法 设计Survivin干扰靶序列，构建重组质粒；将pLL3.7-...
荷包牡丹碱对人肺癌A549细胞生长及端粒酶活性的抑制作用
荷包牡丹碱 A549细胞 端粒酶 G-四链体
2012/4/19
探讨荷包牡丹碱对人肺癌A549细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 A549细胞加入荷包牡丹碱0～200 μmol·L-1分别作用24, 48和72 h， MTT法测定A549细胞的生长抑制作用。荷包牡丹碱0～20 μmol·L-1作用72 h，端粒重复序列扩增(TRAP)法测定端粒酶活性。变温紫外法检测荷包牡丹碱9 μmol·L-1对端粒酶G-四链体的稳定作用。结果 荷包牡丹碱25，50，100...
Layilin是一种新发现与肺腺癌侵袭转移有密切联系的特异性透明质酸受体。本研究旨在观察缺氧/放射条件下活化缺氧/放射双敏感性增强子(Epo/e9)，调控针对layilin的小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)表达，探讨其对人肺腺癌A549细胞受透明质酸诱导侵袭的影响。方法：构建携带Epo/e9增强子和U6启动子且表达针对layilin的siRNA的RNA干扰载体...
大豆异黄酮对A549细胞化疗协同作用
长春瑞滨(NVB) 肺癌 增殖 形态学
2014/8/12
探讨大豆异黄酮(ISF)联合长春瑞滨(NVB)化疗对A549肺癌细胞增殖影响。方法 采用噻唑兰法观察ISF和NVB联用对A549肺癌细胞增殖影响,采用Weeb系数法判定联合用药相互作用,同时采用透射电镜检测A549细胞形态学变化。结果 ISF和NVB单独使用均可时间和浓度依赖性地抑制肺癌A549细胞增殖;20～80 mg/L ISF作用48 h,A549细胞增殖抑制率为15%～23%;8～32 m...
探讨温下方与顺铂(DDP)合用对肺癌多药耐药裸鼠模型皮下移植瘤生长的抑制作用及其相关机制。方法 建立耐药特性稳定的肺腺癌移植瘤裸小鼠动物模型。温下方0.2 ml(含生药0.4 g)/10 g体质量灌胃给药干预。观察温下方与顺铂合用对裸鼠移植瘤生长的影响;RT-PCR法检测多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白基因(mrp)mRNA表达;免疫组化法检测上述基因相应蛋白P-gp、mrp的表达。结果...
探讨高压氧环境下槲皮素在体外对肺腺癌A549/DDP细胞株耐药的逆转及其对P-gp和survivin蛋白表达的影响。方法 MTT法测定槲皮素在高压氧环境下对A549/DDP细胞耐药的逆转作用;流式细胞法(FCM)检测高压氧环境下A549/DDP细胞P-gp和survivin蛋白的表达。结果 槲皮素在高压氧环境下使DDP对A549/DDP细胞的半抑制浓度(IC50)从(31.34±2.99)μg/m...
姜黄素对甲醛致A549细胞氧化损伤拮抗作用
甲醛 姜黄素 氧化损伤 拮抗作用
2014/8/4
探讨姜黄素对甲醛致细胞氧化损伤的拮抗效应。方法 采用A549细胞株作为实验材料,实验设对照组、0.1 mmol/L甲醛染毒组,姜黄素组(0.1 mmol/L甲醛+2.5～20.0 mg/L姜黄素),检测A549细胞中一氧化氮合酶(NOS),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果 甲醛染毒组A549细胞SOD、NOS和GSH-Px活性分别为(21.7...
利用双荧光蛋白报告基因分析系统,验证miR-663的直接靶基因TGFB1,探讨miR-663促进肺癌细胞A549增殖的可能机制。方法实时定量RT-PCR检测10对肺癌组织和正常肺组织中miR-663的表达水平;利用细胞计数和集落形成实验来验证细胞转染miR-663 ASO后的A549细胞增殖。选取表达绿色荧光蛋白的质粒 pcDNA3/EGFP,将TGFB1 3′UTR的一段特异性序列插入该质粒中,...
蝎毒多肽提取物对A549细胞增殖抑制作用机制研究
非小细胞肺癌 血管生成因子 细胞周期 细胞增殖
2012/6/18
观察蝎毒多肽提取物(PESV)对非小细胞肺癌细胞株A549的增殖抑制作用及可能的作用机制。 方法: 采用噻唑蓝(MTT)法观察不同浓度PESV对A549细胞生长与增殖的影响,下游实验将对数生长期的A549细胞分为阴性对照组、PESV低、中、高剂量组,应用流式细胞术、免疫细胞化学法、Western blot法检测PESV干预后细胞周期及VEGF,HIF-1α和PTEN蛋白表达的变化。 结果: MTT...
本研究旨在探讨抑制Src酪氨酸激酶活性对人肺癌A549/DDP细胞耐药性及多药耐药蛋白（muti-drug resistance 1, MDR1）和肺耐药相关蛋白（lung resistance-related protein, LRP）表达的影响。方法 以Src酪氨酸激酶抑制剂作用于A549/DDP细胞，应用Western blot法检测肿瘤细胞Src酪氨酸激活性的变化，CellTiter-Gl...
探讨丹参素(DSS)抗肿瘤作用的分子机制,重点在于是否与其抗氧化作用及改变非小细胞肺癌A549细胞内氧化还原状态及影响相关核转录因子和信号通路有关。 方法: 通过体外DPPH自由基清除、高铁还原、亚铁螯合实验和DCFH-DA荧光探针标记ROS,检测DSS的抗氧化活性及对A549细胞内ROS水平的影响;采用MTT法测定DSS对A549细胞增殖能力的时效与量效关系;采用Western blot技术检测...
近年研究显示整合素α5β1作为整合素家族的重要部分与非小细胞肺癌的转移性、浸润性和低分化趋向密切相关。本研究应用整合素α5/β1 siRNA双链及ERK抑制剂PD98095干预人肺癌细胞A549，探讨整合素α5β1蛋白表达对A549细胞生长和迁移能力的影响及其细胞内信号转导机制。方法 实验分为未转染组、脂质体组、整合素α5β1 siRNA转染组和PD98095组四组。采用免疫印迹（Western ...
CpG ODN增强人肺癌细胞株A549放射增敏作用的研究
辐射耐受性 CpG ODN1826 A549
2012/6/1
初步探讨CpG ODN增强人肺腺上皮细胞株A549放射增敏作用。方法 ELISA法检测细胞TNFα、IL12和INFγ的分泌水平，Griess检测细胞NO的含量并观察CpG ODN1826与β射线诱导A549细胞AP1活化的抑制作用。结果 CpG ODN增加了人肺癌细胞株A549 TNFα、IL12、INFγ和NO的分泌，在联合β射线照射后对A549细胞的杀伤作用更加显著，并显著抑制...
研究木犀草素诱导非小细胞肺癌细胞株A549细胞凋亡和抑制其细胞周期(G2期)的分子机制。 方法: MTT法分析木犀草素对A549细胞的生长抑制作用和半数抑制率IC50。Hoechst 33258核染色,Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western blot分析木犀草素引起的周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的变化。Western blot和免疫细胞化学推测可能存在的...
莪术油对人肺腺癌A549细胞中组织蛋白酶D,K表达的影响
胶原 组织蛋白酶K 组织蛋白酶D
2012/4/26
探讨莪术油对A549细胞中胶原及组织蛋白酶D,K表达的影响。 方法: 用不同浓度的莪术油(0,40,80,120 mg·L-1)作用A549细胞,苦味酸天狼猩红染色法观察莪术油对A549细胞层胶原分泌的动态变化;酶法测定细胞中可溶性羟脯氨酸的分泌;Western blot检测Cat D,Cat K的表达情况。 结果: 莪术油刺激细胞后A549细胞分泌的胶原含量随剂量和作用的时间增加而减少。Cat ...