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为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制,将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法,观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作用;用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin V/PI双标记、Hoechst 33258荧光染色等技术...
比较人肺腺癌细胞株A549和耐顺铂株A549/DDP细胞的蛋白表达谱,筛选肺癌耐药相关蛋白,为阐明肿瘤细胞的耐药提供新线索。
人肺腺癌细胞耐顺铂株A549/CDDP的比较蛋白质组学研究
肺肿瘤 顺铂 耐药性 蛋白质组学
2013/12/10
化疗是肺癌综合治疗的重要部分,但是肿瘤细胞耐药常导致化疗失败。本研究采用蛋白组学方法研究人肺腺癌细胞A549对顺铂产生耐药性前后的蛋白表达差异,筛选有价值的靶位。方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用逐步增加剂量与大剂量冲击相结合的方法,诱导建立耐顺铂细胞株A549/CDDP。对A549与A549/CDDP进行蛋白组学研究,即利用双向凝胶电泳(2-DE)分离两组总蛋白后,...
Nrf2及其靶基因在人肺腺癌A549顺铂耐药细胞株中的表达和意义
NF-E2相关因子2 耐药性 顺铂 肺肿瘤
2013/12/10
NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2, Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,已有研究表明Nrf2及其信号传导通路与卵巢癌顺铂耐药密切相关,但Nrf2与肺腺癌耐药相关性的研究罕见报道,本研究的目的是测定转录因子Nrf2及其靶基因在人肺腺癌A549顺铂耐药细胞株(A549/DDP)及其亲本细胞(A549)中的定量表达,探讨肺腺癌顺铂耐药机制。方法 采用MT...
碳离子辐照对人肺癌细胞A549细胞周期进程的影响
肺癌细胞 碳离子辐照
2009/10/28
选取对数生长期人肺癌细胞A549接受0—6.0 Gy 碳离子照射, 用克隆形成法检测细胞的存活率; 并于照射后12和24 h收集细胞, 用流式细胞术检测细胞周期各时相的细胞百分比, 观察不同剂量碳离子辐照对A549细胞周期进程的影响。 结果显示: 0—6.0 Gy 碳离子照射后细胞存活率显著下降; 照射后12 h细胞发生G0/G1期阻滞, 而照射后24 h, 1.0 Gy 照射组细胞在G0/G1期...
观察瘦素对人肺腺癌 A549 细胞增殖及p-ERK1/2、VEGF 表达的影响。初步探讨瘦素在促进肿瘤血管生成中的机制。方法 对人肺腺癌 A549 细胞采用细胞培养,MTT 法检测不同浓度瘦素对人肺腺癌A549细胞增殖影响,免疫组织化学法检测VEGF表达、Western blot 方法检测瘦素对p-ERK1/2、VEGF表达的影响。结果 在一定范围内,瘦素呈时间、剂量依赖性促进A549细胞的生长(...
促红细胞生成素对肺腺癌A549细胞生长和凋亡作用的实验研究
肺肿瘤 促红细胞生成素 凋亡 血管内皮生长因子
2013/12/10
促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)对肿瘤细胞的具体作用存在争议。本研究旨在探讨细胞因子超家族成员EPO对肺腺癌A549细胞株生物学行为的影响。方法 构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)-hEPO,并转染肺腺癌A549细胞株。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测转染后目的基因的蛋白表达水平; MTT法和流式细胞仪检测转染后A549细胞生长、周期及凋亡率等生物学行为的变化; ...
目的:本研究旨在应用RNA干扰技术,诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。 方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体,筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株增殖和细胞周期分布状况。 结果:根据siRNA表达载体的设计原则,构建了能在哺乳动物细胞稳定表达的siRNA载体5个(4个位点匹配实验组和1个位点错配对...
目的:研究转染nm23-H1基因对体外培养A549细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机理。方法:构建nm23-H1基因的真核表达载体,转染到体外培养的人肺腺癌细胞A549中,通过G418筛选出稳定表达克隆,RT-PCR及免疫组化检测nm23-H1在细胞内的表达情况。绘制细胞生长曲线检测nm23-H1基因对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞周期,原子力显微镜观察细胞膜表面伪足的超微结构。 结果:转染后的肿...
The Intracellular Concentration of Components of the Ubiquitin System in A549 Culture Cells During UV Treatment
UV Treatment ubiquitin activating enzyme (E1) ubiquitin conjugating enzyme (E2)
2009/6/30
This study attempts to determine a link between the intracellular components of the ubiquitin (Ub) system and the process of DNA repair in eukaryotes. It is possible to investigate this link in two wa...
缺氧诱导对人非小细胞肺癌A549凋亡及Survivin基因表达的影响
缺氧 非小细胞肺癌 凋亡 Survivin
2009/6/15
背景与目的: 观察缺氧诱导对非小细胞肺癌细胞株A549凋亡及其Survivin基因表达变化的影响。 材料与方法: 利用CoCl2构建缺氧诱导模型,采用MTT法观察不同浓度CoCl2(0、50、100、200、400 μmol/L)作用A549细胞以及相同浓度CoCl2 (200 μmol/L)作用不同时间(4、12、24 h)后,A549细胞增殖的变化,实验同时设对照组;荧光显微镜观察细胞核的形态...
构建靶向存活素(survivin)的干扰RNA(siRNA)质粒,观察其对A549细胞增殖、凋亡以及顺铂敏感性的影响。方法:应用pSilencer U6质粒构建survivin siRNA干扰质粒,RT PCR和Western blotting检测survivin mRNA和蛋白的表达,DAPI染色法检测细胞的凋亡,MTT法检测细胞的增殖。结果:成功构建了survivin siRNA干扰质粒。Su...
构建靶向K ras的siRNA,研究K ras siRNA对K ras基因突变型肺癌细胞A549及K ras野生型小细胞肺癌细胞NCI H446生长和迁移的抑制作用。方法:设计并人工合成4条K ras siRNA(针对野生型K ras基因的K ras siRNA1~ K ras siRNA3;针对突变型K ras 基因的K ras siRNA4),并分别转入A549和NCI H...
目的: 观察RNA干扰技术能否有效抑制非小细胞肺癌细胞株A549细胞中Polo-like激酶1(Plk1)的表达水平,以及抑制后对A549细胞生长的影响。方法: 运用脂质体法,以Plk1为靶点,构建能产生siRNA的质粒载体psiRNA-hH1-Plk1并转入A549细胞。RT-PCR检测Plk1 mRNA表达的变化、Western blotting检测Plk1、cyclin B1、p53蛋白的表...
目的: 探讨Polo-like激酶1(Plk1)基因表达下调对肺癌细胞周期分布及其生长的影响。方法: 培养肺腺癌细胞株A549,构建表达Plk1反义RNA的质粒pcDNA3-Plk1,通过脂质体介导转染A549细胞,采用RT-PCR和Western blotting的方法检测Plk1基因的表达,细胞计数、BrdU脉冲标记检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期变化和凋亡,MTT法检测长春瑞宾(NVB)...