搜索结果: 16-30 共查到“兽医学 RT-PCR”相关记录53条 . 查询时间(0.146 秒)
参照国内外已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因序列设计1对引物,建立检测PRRSV的RT-PCR方法,并对长春周边不同地区10个猪场送检的20份病料进行检测。特异性试验、敏感性试验和重复性试验结果表明,此方法可以用于临床检测PRRSV。应用该方法从3个猪场的4份病料检出PRRSV,证实长春周边地区存在PRRSV感染。
根据猪札幌病毒(Porcine Sapovirus, SaV)的VP1保守基因序列设计引物和探针,通过对荧光定量RTPCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RTPCR检测方法,并与常规RTPCR检测方法进行了比较。结果表明,荧光定量RTPCR方法的检测灵敏度可达16.1拷贝·μL1,而常规RTPCR方法的灵敏度为1.61 ×103拷贝·μL1。对216份粪样的检测结果进一步表...
根据猪札幌病毒(Porcine Sapovirus, SaV)的VP1保守基因序列设计引物和探针,通过对荧光定量RTPCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RTPCR检测方法,并与常规RTPCR检测方法进行了比较。结果表明,荧光定量RTPCR方法的检测灵敏度可达16.1拷贝·μL1,而常规RTPCR方法的灵敏度为1.61 ×103拷贝·μL1。对216份粪样的检测结果进一步表...
根据新城疫病毒M基因的保守序列,设计合成1对引物和TaqMan 探针,以作者实验室构建并保存的鹅源新城疫病毒ZJ1株M基因阳性重组质粒为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,结合ABI公司的7300型荧光定量PCR仪,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测新城疫病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RTPCR方法。该方法在106~101拷贝范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中3拷贝·μL-...
应用兼并引物RT-PCR快速检测及鉴别气载鸡新城疫病毒
鸡场 气载新城疫病毒 逆转录聚合酶链反应 检测
2009/9/8
为了快速检测并鉴别鸡舍内外空气中的新城疫病毒(NDV),应用AGI30气体收集器在一大型商品肉鸡舍舍内外收集气体,同时采集鸡的气管和泄殖腔拭子,采用兼并引物RTPCR检测气体样品和拭子中的NDV,并鉴别NDV的毒力;同时分离、纯化气体样品中的NDV,用常规毒力学试验鉴别分离株的毒力。结果RTPCR检测到舍内2/15的气体样品和4/15的拭子中同时有强毒和弱毒株,3/15气体样品和13/15的...
蒙古绵羊瘤胃固、液相附着微生物的RT-PCR检测
Real-time PCR 蒙古绵羊 瘤胃 微生物 生态分布
2009/8/31
【目的】应用Real-time PCR(RT-PCR)对蒙古绵羊瘤胃内容物固、液相附着微生物的生态分布进行定量研究。【方法】采集3只蒙古绵羊瘤胃内容物,固液分离后对各相中所附着的微生物进行定量检测,包括总细菌、总厌氧真菌和3种主要纤维降解菌-白色瘤胃球菌Ruminococcus albus、黄色瘤胃球菌Ruminococcus flavefaciens、产琥珀酸拟杆菌Fibrobacter suc...
应用猪瘟病毒(CSFV)及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)特异性引物和TaqMan水解探针,建立一种同时检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT-PCR方法。该方法可检测到3.2 TCID50的CSFV和1.8 TCID50的北美洲型PRRSV,比常规PCR方法敏感性高50倍以上。用复合荧光定量RT-PCR方法对155份现地样品进行检测,结果73份为PRRSV阳性,16份为CSFV阳...
长距离RT-PCR 非特异性扩增的鉴定与排除
RT- PCR 乙脑病毒 非特异性扩增
2009/5/12
根据已经测定的乙脑病毒WHe 株全基因组序列( GenBank EF107527) , 设计1 对引物扩增基因组全长cDNA 和2 对特异性的鉴定引
物。经RT- PCR 技术扩增后, 得到约9 kb 的产物, 经过反复实验, 鉴定为外源性污染核酸扩增产物, 并加以有效的排除, 初步的研究表明该产物可能是由外源性污染核酸自身反向部分互补扩增所致。
RT-PCR技术检测河南省猪瘟病毒的研究
猪瘟病毒 RT-PCR
2009/4/27
对25个猪场进行流行病学调查,对191只疑似猪瘟发病猪进行RT-PCR 检测,结果表明,猪瘟阳性检出率平均为77.4 %。
鸡传染性支气管炎病毒RT-PCR检测方法的建立
鸡传染性支气管炎病毒 RT-PCR 检测
2009/3/11
根据GenBank上发表的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因序列,针对IBV M基因全序列设计合成了一对引物, 以IBV疫苗株为模板, 建立了检测IBV的RT-PCR方法。应用该方法对IBV疫苗株RNA进行扩增, 获得与预期大小相符, 长度为1105bp的特异性目的片段;敏感性测定该RT-PCR可扩增到18pg的IBV-M-cDNA。结果表明建立的RT-PCR方法对IBV的检测敏感性高、特异性强,...
猪hsp70和hsp90荧光定量RT—PCR检测方法的建立
猪 hsp70 hsp90 GAPDH 荧光定量RT-PCR
2009/1/15
猪hsp70和hsp90荧光定量RT—PCR检测方法的建立。
RT-PCR技术检测猪流感病毒
猪流感病毒 RT-PCR 检测
2009/1/5
根据猪流感病毒(SIV)的M基因的序列,设计合成了1对引物,建立了检测猪流感的RT-PCR方法。应用该方法对H1、H3、H9亚型的猪流感病毒进行基因扩增,均获得了分子量为460bp的特异性目的片段,而对PRRSV、 PCV2、PRV、CSFV进行同条件检测,结果均为阴性;SIV扩增产物测序结果与SIV其他毒株序列同源性达99%~100% 。敏感性试验表明,该方法可检测到103 EID50的SIV;...
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
2008/12/1
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26~50日龄商品鸡外周血淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线...
禽流感病毒RT-PCR检测技术的研究与应用
禽流感病毒 PCR检测
2008/11/5
本研究依据我国禽流感流行情况,结合国内该病毒的遗传演化规律,在HA基因全片段范围内设计多对引物,通过分析、比较现地流行毒株的覆盖情况,确定适合于我国禽流感流行毒株的RT-PCR引物,建立H5、H7、H9、N1、N2亚型RT-PCR方法;针对家禽中流行较为广泛、危害相对大的N1、N2亚型神经氨酸酶基因建立一种RT-PCR鉴别方法,建立N1、N2神经氨酸酶亚型鉴别RT-PCR方法;进一步扩展建立了以M...