搜索结果: 16-30 共查到“知识库 动物病毒学”相关记录81条 . 查询时间(1.375 秒)
为了灵敏而便捷的检测猪圆环病毒3型（PCV3），根据PCV3 ORF2基因组保守序列设计合成4对引物，先使用荧光染料（SYBR）定量PCR法验证其能否有效扩增目的片段，并根据结果和引物对所扩增序列的交集进一步设计TaqMan探针，通过优化反应条件和反应体系建立快速检测PCV3的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示，SYBR染料法和TaqMan探针法均能有效地扩增PCV3标准质粒以及其他阳性样品，并...
猪圆环病毒3型LAMP检测方法的建立与应用
猪圆环病毒3型 RT-LAMP 检测
2018/6/26
为快速诊断和检测猪圆环病毒3型（PCV3），本研究根据其ORF2基因保守序列，设计特异性引物，并通过Bst DNA聚合酶、引物最佳浓度比例、Mg2+、dNTPs和甜菜碱浓度及反应条件优化，建立了环介导等温核酸扩增（LAMP）检测方法。结果显示，59℃恒温扩增36 min即可出现梯形条带，且产物亦可通过SYBR Green Ⅰ染色进行判断。该方法最低检测限为1.0×101copies·μL-1，与猪...
猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析
PRV 细胞自噬 细胞凋亡 Beclin1
2018/6/26
旨在研究伪狂犬病病毒（PRV）感染后细胞自噬和凋亡情况，进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹（WB）方法检测PRV感染细胞的自噬水平；利用流式细胞术探讨凋亡水平；最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平。结果显示，PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多，而P62显著下降，且AKT（S473...
广西某市屠宰猪淋巴结猪圆环病毒3型的病原检测及遗传演化分析
猪圆环病毒3型 全基因 序列分析 遗传演化分析
2018/6/26
为了解猪圆环病毒3型（PCV3）在广西地区健康猪群中的遗传变异情况，对广西某市屠宰场健康猪的181份淋巴结进行PCV3的病原检测，结果PCV3阳性率为24.31%。这说明在健康屠宰猪群中PCV3的感染率较高，带毒情况较为严重。对其中的阳性样品进行全序列扩增，最终得到6条PCV3全基因组序列。将试验所得PCV3全基因组序列与GenBank上已发表的国内外毒株全基因组序列相比较，结果发现PCV3全基因...
旨在构建变异猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M和N双基因融合质粒，并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株（GenBank登陆号KJ646580）的M基因和N基因，将M基因克隆至pEASY-Blunt E2（pE2）表达载体，构建出pE2-M质粒。利用同源重组原理，采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至E2-M片段，转化到Trans 1-T1感受态细胞中，构建出pE2-M-N融合...
GP5蛋白被认为是猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导中和抗体的主要蛋白，为探讨GP5蛋白诱导免疫保护的能力，本研究用杆状病毒/昆虫表达系统分别表达了全长和截短的GP5蛋白，同时用大肠杆菌表达系统表达了截短的GP5蛋白。三种重组蛋白经纯化后，免疫小鼠制备抗血清，以PRRSV全病毒作为ELISA包被抗原检测抗血清时，原核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1∶200，真核表达的全长GP5蛋白抗血清效价为1∶800...
为研究肿瘤进行性位点2（TPL2）在仓鼠肾细胞（BHK-21）中对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响，使用FMDV感染BHK-21细胞，通过qRT-PCR技术检测FMDV感染对内源性TPL2转录水平的影响；根据GenBank公布的TPL2基因序列（NM007746.2）设计构建TPL2的真核表达质粒以及设计并合成宿主TPL2的RNAi序列，利用脂质体方法转染BHK-21细胞，通过qRT-PCR和We...
草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型是导致草鱼出血病的主要病原体之一，目前在我国广泛流行。本研究根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型基因序列，设计了草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型特异性探针和PCR引物，通过优化反应条件，建立了草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型一步法TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。试验对反转录和PCR反应体系进行摸索，通过优化的冻干工艺制备出草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型全预混RT-PCR试剂，在荧光定量PCR中，冻干试剂的检...
猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是影响全球养猪业的一种重要病原。近年来，国内新出现的类NADC30毒株导致临床PRRS疫情再次出现。本研究旨在构建PRRSV类NADC30毒株CHsx1401的感染性克隆，以期为研究该类毒株遗传变异与演化以及与其他毒株致病性差异的分子机制奠定基础。将类NADC30毒株CHsx1401全长基因组分为4个片段进行RT-PCR扩增，分别将扩增片段克隆到pJET1.2载...
K亚群禽白血病病毒5'LTR序列及启动活性分析
ALV-K 致病性 LTR 启动活性
2018/5/4
通过对ALV-K 5'LTR序列及其启动活性比较分析，以探究5'LTR对ALV-K体外复制能力的影响。选取广东某黄羽祖代种鸡场健康鸡群中分离到的ALV-K（GDFX0601）毒株作为研究对象，将其5'LTR核苷酸序列与国内外不同亚群ALV分离株比较分析，并将该ALV-K接种DF-1细胞，采用ELISA对细胞培养上清进行ALV p27抗原检测以分析其在DF-1细胞上的复制能力，还分别将ALV-K（G...
旨在从牛、羊监控动物群中，对流行于我国的帕利亚姆血清群病毒（PALV）进行分离、鉴定与序列特征分析，明确我国流行毒株与国外毒株之间的关系。自监控动物采集的PALV阳性血液接种BHK-21细胞进行病毒分离；对所分离PALV毒株的Seg-7与Seg-2基因节段进行扩增、测序与序列分析；通过高分辨率琼脂糖凝胶电泳分析不同血清型PALV代表毒株基因组的“电泳带型”特征；通过免疫荧光与中和试验分析不同血清型...
为了解川藏高原地区牦牛牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）的感染情况和牦牛BVDV的主要流行亚型及遗传变异情况，采用RT-PCR方法，对四川和西藏部分高原地区采集的149份临床腹泻牦牛粪便开展分子流行病学调查，根据5'-UTR、Npro和E2基因的变异研究该地区牦牛BVDV的遗传变异情况。同时，通过RT-PCR、病毒分离培养和间接免疫荧光检测等方法鉴...
临床样本中水貂嵌杯病毒的全基因组分析
水貂嵌杯病毒 基因组 分析 高通量测序
2018/5/4
为分析水貂嵌杯病毒中国株的特性，采用高通量测序方法测定青岛某养殖场检测的水貂嵌杯病毒的基因组，并对其进行特性分析与比较基因组研究。结果显示，该病毒全基因大小为8 427 bp，具有与其他嵌杯病毒相似的结构和基因顺序，5'端具有帽子结构，3'端具有A尾，其与19株代表性毒株的全基因组和衣壳蛋白氨基酸序列同源性分析都证实该病毒与我国2011年报道的水貂嵌杯病毒同源性高，BLAST进一步确认该病毒不属水...
河北省猪腹泻相关病毒的检测及猪流行性腹泻病毒S基因遗传变异分析
猪病毒性腹泻 流行病学调查 猪流行性腹泻病毒 序列分析
2018/4/16
为了解当前河北地区猪腹泻主要相关病毒流行情况，对2016年4月-2017年2月收集的河北地区腹泻样品，采用荧光定量PCR检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒，并对扩增获得的9株PEDV S基因进行测序和序列分析。结果显示，全年腹泻病发生率为9.70%，在春冬季节多发。其中猪流行性腹泻病毒检出率最高，为13.89%，其在仔猪中检出率为19.28%，在育肥猪中检出率为17....