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采用循环伏安方法研究了几种不同来源的超氧化物歧化酶在氧化铟电极上的电化学行为,并与裸金电极及半胱氨酸修饰的金电极上所得实验结果作了比较及讨论。
DNA连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA的复制和修复过程中起重要作用. DNA连接酶分为两大类:一类是利用ATP的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP的DNA连接酶,另一类是利用NAD+的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD+的DNA连接酶.研究发现,细菌的DNA连接酶都是依赖NAD+的, 且有非常相似的序列和相近的分子质量,其酶分子分为两个功能区:N端区...
采用“界面亲和层析”,从商品Candida rugosa脂肪酶(CRL)中分离到三个同工酶(CRL-1、CRL-2和CRL-3),它们在水-有机溶剂双液相体系中催化(R,S)-萘普生甲酯的不对称水解反应,具有不同的立体选择性.分析表明:CRL-1和CRL-2上不同程度地非共价结合有小分子的酸性化合物,阻碍了其活性位点处疏水腔的完全开放;CRL-3上不含有该小分子酸性化合物,活性位点处疏水腔可处于完...
单胺氧化酶     单胺氧化酶  神经递质  行为       2008/10/13
单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)是生物体内一种十分重要的酶,它在大脑和周围神经组织中催化一些生物体产生的胺,氧化脱氨产生过氧化氢(H2O2).单胺氧化酶A和B基因的克隆清楚地证明了这些酶是由不同的多肽组成的.单胺氧化酶A和B的基因定位于X染色体(Xp11.23),都由15个外显子组成,而且它们的内含子-外显子组织是完全一致的.这些事实表明单胺氧化酶A和B的基因很可能从同一个...
垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)及其受体存在于许多动物的下丘脑和垂体中,而且在肾上腺、睾丸、卵巢、肝脏、肾脏、胰腺、松果腺、心脏、脊椎、神经节、呼吸系统和消化系统等组织或系统中也存在,其中肾上腺含量最高.在这些组织或系统中,通过Ca2+、Na+、腺苷酸环化酶或磷酸肌醇等作用通路,PACAP发挥神经递质/调质、或神经营养因子等生物学功能.
为了探讨绝经后骨质疏松胶原代谢异常的分子机制.采用RT-PCR和Gel-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分别检测卵巢切除大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA水平及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)的活性,免疫组化观察骨组织Ⅰ型胶原蛋白量.卵巢切除大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达降低约26.3%,pro-MMP-9活性明显提高(P<0.05),应用雌激素治疗后Ⅰ型...
采用正交实验法,考察了铸膜液配比对醋酸纤维素固定化氨基酰化酶微孔滤膜的影响,对酶膜的泡点压力、孔径、孔隙率及透水速率等性能进行了表征.结果表明,铸膜液组合最佳时,酶相对活力产率高达98.2%,酶膜的透水率适当,重复使用10次后仍保留原活力的79.7%,而其存放稳定性也大大提高.
用NaOH代替苯乙胺作为14CO2的吸附剂,改进谷氨酸脱羧酶(GAD)活性的放射测定方法,结果发现NaOH为吸附剂组内变异系数为9.6%, 以苯乙胺为吸附剂组内变异系数为31.9%;以NaOH为吸附剂72 h后测量其放射活性仍稳定不变,以苯乙胺为吸附剂者1 h后放射性活性即下降47%,6 h后已降低至本底水平;14CO2重吸收实验亦证明以苯乙胺为吸附剂吸附的14CO2 6 h内已有80%以上重新...
为探索新的固定化酶方法,以漆酚-酪氨酸树酯为固定化酶载体,与Cu2+络合制备成高分子络合剂,对多酚氧化酶固定化,实验结果表明,这种固定化方法是可行的.固定化多酚氧化酶的适宜pH值为6.64和7.17,在60℃放置25 min后活力保留50.7%,以邻苯二酚为底物的米氏常数为1.49×10-2 mol/L,较游离酶略小.根据实验结果提出了固定化酶模型.
将尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2(A.aBPLA2)基因克隆至温敏表达载体pBLMVL2,在大肠杆菌RR1中成功诱导表达.表达产物A.aBPLA2约占细菌蛋白质总量的20%,并以包涵体的形式存在.纯化包涵体后,将产物变性、复性,然后用FPLC SuperoseTM12纯化,产物经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测只有单一条带.对纯化后的表达A.aBPLA2进行了酶活性、抑制血小板聚集活性和溶血活性...
细胞虽然拥有多种修复途径,但有些DNA损伤仍不可避免地会逃避修复而在基因组上保留下来,细胞跨损伤DNA合成的分子机制一直是DNA修复中主要的未解决问题之一.最近通过对一类结构相关性UmuC/DinB蛋白质超家族成员的研究发现它们具有DNA聚合酶功能.这类新发现的DNA聚合酶不同于经典的复制性DNA聚合酶,它们能以易误/突变(error-prone/mutagenic)或无误(error-free)...
D-葡萄糖异构酶(GI)能分别催化D-葡萄糖和D-木糖异构为D-果糖和D-木酮糖. 它是工业上生产高果糖浆的关键酶. 在GI负氢离子转移机制中,其主要特征是底物的开环、通过C2至C1间负氢离子转移的GI异构化作用、以及产物的闭环. GI基因已在同源、异源宿主中获得克隆、测序和超量表达. 经过蛋白质工程改造的GI将是未来最重要的工业用酶之一.
通过以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和层析,从蚯蚓(大平二号, 即赤子爱胜蚓)纯化出的纤溶酶是一组非均一的纤维蛋白水解酶.经DEAE-纤维素离子交换和制备电泳进一步分离纯化,得到12个单一组分. 这些组分的等电点(pI)按照它们在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)图谱上的顺序从4.0开始依次降低; SDS-PAGE证明, 除3、4外,其余组分均只含一种多肽链,分子质量在22~34 ku之间;用shiff...
根据血栓溶解会引起吸光度下降的特性,在细胞培养板上制作小血栓,利用酶标仪同时检测多个样品的吸光度变化.发现反应初期,血栓吸光度的降低同时间呈线性关系,其回归方程的斜率k与酶活性成正比.因此可用k来表示酶活性.此方法与蛋白凝块溶解时间法(CLT法)相关性很好.该法省时,成本低,是一种较好的、实用的检测溶血栓酶活性的方法.
三叶因子家族     三叶因子家族  表达位点  结构  功能  作用机理       2008/7/2
三叶因子家族是一类具有特殊结构——P结构域的蛋白质家族, P结构域包含6个高度保守的半胱氨酸残基及精氨酸、甘氨酸、色氨酸和苯丙氨酸残基.半胱氨酸残基以Cys1-Cys5, Cys2-Cys4, Cys3-Cys6连接形成三个链内二硫桥.已发现多种含有P结构域的多肽,其中最引人注目的是TFF1/ pS2、TFF2/SP及TFF3/ITF,在正常组织中其主要表达位点分别为胃基底和胃体(TFF1...

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