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彝族、藏族与哈尼族血清胆硷酯酶的遗传多态性
人类群体遗传学 胆硷酯酶 遗传多态性
2008/2/3
摘要按照Kalow等的方法对中国3个人群的血清胆硷酯酶（简称ChE）的遗传多态性进行了研究。3个人群是四川省布拖县彝族（197人）、西藏自治区拉萨市藏族（100人）及云南省元江县哈尼族（170人）。根据每一个体的地布卡因值和氟化钠值，按Motulsky的分型标准进行分型。结果表明，在彝族中有3人属一般型+抗氟化物型（UF）；在藏族中有2名UF；在哈尼族中也有3名UF，未发现不典型型（即抗地布卡因型...
大鼠非致瘤四倍体细胞系的建立及细胞遗传学和酶学特征
四倍体细胞系 HSR-X染色体 NORs活性 磷酸醋酶
2008/2/3
摘要从大鼠自然诱发的肉瘤细胞中，我们建立了一个四倍体细胞系（4，二84)，命名为RC (ratCCII )。它具有典型的成纤维细胞外形，能在玻璃表面贴壁生长，但不能生长在琼脂半固体培养基中。该细胞在含15％ 小牛血清的RPMI 164。培养基中生长良好，至今已连续繁殖112世代，细胞群体倍增时间约为15小时。染色体G一带分析表明，RC为整四倍体细胞，它的1条X染色体在第32至34区为均染区。RC细...
限制性内切酶诱发的姊妹染色单体互换
限制酶 姊妹染色单体互换 中国地鼠卵巢细胞
2008/2/2
摘要用限制性内切酶PstI，SalI，PvuII和BamHI处理CHO细胞后，发现其SCE率升高，与对照相比，前三种酶具有显著性差异。但这些酶诱导SCE的效应与其致染色体畸变效应相比则较弱，提示引起DNA双链断裂的限制性内切酶不是SCE的强刺激物。实验结果表明，BrdU取代胸苷不能消除限制酶对底物DNA的识别及裂解。
摘要用PCR随机诱变方法，研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚2，3-双加养酶性质的影响。比较分析了突变体ro229Ser和Glu243Gly与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Pro229→Ser或Glu243→Gly并未改变酶的最适反应温度（均为60℃）；突变体Pro229Ser（Kcat／Km＝4.89±0.01×106mol－1s－1）以及突变体Glu243Gly(Kcat／Km＝5.88±0.0...
云南10个民族红细胞酸性磷酸酶型分布调查
红细胞酸性磷酸酶 基因频率,表型分布 民族 电泳
2008/2/1
摘要用淀粉凝胶电泳法对云南省汉族及9个少数民族的红细胞酸性磷酸酶(ACP1)的表型分布进行 了调查，检出A、BA和B 3种表型，计算得云南汉、彝、白、傣、瑶、佤、哈尼、布朗、基诺 和拉祜族ACPA1、ACPB1的基因频率依次为0.2067、0.7933；0.2406、0.7594；0.2341、0.76 59；0.3750、0.6250；0.2300、0.7700；0.272、0.7273；0.3...
摘要我们建立了测定间-α-胰蛋白酶抑制因子遗传表型的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦免疫固定 技术，应用这种方法对居住在成都地区的汉族群体进行了群体研究和家系调查，结果表明中 国汉族人群间-α-胰蛋白酶抑制因子具有遗传多态性，它有希望成为法医血液遗传学新的遗 传标记。
摘要采用水平淀粉凝胶电泳技术及应用等位酶分析方法， 研究我国河北黄骅、辽宁葫芦岛宽翅曲背蝗两个自然种群的遗传多样性和遗传分化。 在检测的11种酶15个酶基因座位中， Adk-1、Fbp-1、G3pd-1 和Mdh-2 基因座位的等位基因少，而Fbp-2、Me-1 和 Mdh-1基因座位的等位基因多。对每个基因座位的各基因型进行(2检验， 除Mdh-1在辽宁葫芦岛种群、Adk-1在河北黄骅种群分别符...
重组人纤溶酶原Kringle1-5的制备及其
Kringle1-5 纤溶酶原 肿瘤血管生成抑制剂 血管抑素 原核表达
2008/1/30
摘要为了研究重组人纤溶酶原 Kringle1-5(K1-5)的抗血管生成活性及其对内皮细胞增殖的影响, 通过PCR扩增人纤溶酶原K1-5 cDNA，定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体pET-K1-5, 转化E.coli BL21(DE3), IPTG诱导表达,SDS-PAGE 和Western 杂交检测K1-5的表达。鸡胚尿囊膜 (CAM) 实验和MTT实验分别检测重组人...
摘要在大肠杆菌中建立了一套用于测定 DNA聚合酶在PCR过程中复制精确性的系统,并测定了耐热FD DNA聚合酶在PCR扩增过程中的复制精确性。这一系统主要包括以质粒pUC118和pUC119为出发质粒所构建的一套共6个突变质粒,分别为pFDFP118和pFDFP119(+1移码突变)、pFDFM118和pFDFM119(-1移码突变)、pFDFU118和pFDFU119(碱基置换突变)。这些突变质...
通过体外分子进化技术获得耐高温β-葡萄糖苷酸酶的研究
β-葡萄糖苷酸酶 体外分子进化 基因重排 耐高温
2008/1/29
摘要采用高保真聚合酶从质粒pBI121中扩增出1.8kb的专一条带,克隆入pBluescript SK载体,测序结果显示与报道一致.该克隆GUS基因被用作对照,再以此为模板,通过DNA重排技术,经DNaseⅠ降解,Primerless PCR, Primer PCR重新得到大量的突变GUS基因.这些突变的GUS基因构建入原核表达载体pG251中,电击转化大肠杆菌菌株DH5α,构建GUS基因突变体库...
辽宁碱蓬胆碱单加氧酶(CMO)基因启动子分离及功能元件分析
辽宁碱蓬 胆碱单加氧酶 启动子
2008/1/24
摘要根据已知的辽宁碱蓬CMO cDNA 5′ 端序列设计两个基因特异的反向引物（CR1，CR2），通过衔接头PCR获得了CMO基因起始密码子上游498 bp的序列。根据所获得的序列设计两个基因特异的反向引物（CR3，CR4），用CR2、CR3、CR4分别与4个简并引物配对，通过TAIL-PCR扩增，获得了约2 kb 的序列。经Sequencer软件拼接上述两段序列，获得了CMO基因起始密码子上游2...
含有LRR基序的胡萝卜抗冻蛋白虽然具有抗冻活性，但却属于植物PGIP家族。胡萝卜抗冻蛋白虽然在氨基酸序列上属于PGIP家族，但却失去了抑制外源真菌的PGase活性，并且获得了一个重要的活性——抑制冰晶的生长和重结晶。胡萝卜抗冻蛋白的这种活性的变化一直被认为是由于植物自身长期进化的结果，并认为最初的DcAFP也应当具有抑制PGase的活性。采用酵母双杂交来分析DcAFP是否还拥有PGIP的活性。通过...
采用双引物定点突变法，构建了以236位氨基酸为起始密码子的Taq酶(TaqND236)的高表达质粒。并以-1移码突变质粒pFDPM118作为模板，建立了测定DNA聚合酶的体外合成精确性的Gapped-DNA系统。通过转化大肠杆菌TG1菌株后计数X-gal平板上蓝白菌落的比例，测定了TaqND236两种DNA聚合酶在DNA体外合成中的移码突变率，发现缺失后的TaqND236复制精确性提高了10倍以上...
T7启动子具有真核生物聚合酶Ⅱ顺式作用因子的功能
T7启动子 顺式作用因子 真核生物RNA聚合酶Ⅱ 转录起始
2008/1/21
根据α-鹅膏蕈碱(α-amanitin)对真核生物RNA聚合酶的选择性抑制,以氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)作为报道基因进行体内表达实验,证明T7噬菌体启动子可为真核生物RNA聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性DNA-蛋白质凝胶泳动技术,分别以TATA框、CAAT框、GC框和八核苷酸序列(octam er)为竞争性寡核苷酸分子,发现人工合成的T7启动子可能与TFⅡD起始转录因子结合,形成DNA-核蛋...