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中国科学院大连化学物理研究所专利：一种体外扩增肿瘤干细胞的方法
中国科学院大连化学物理研究所 专利 体外扩增 肿瘤干细胞
2023/12/28
本发明是一种体外扩增肿瘤干细胞的方法，即利用海藻酸盐凝胶支架对肿瘤细胞进行体外三维培养，通过改变海藻酸钠的分子量、古罗糖醛酸含量与甘露糖醛酸含量（GM）比、钙离子浓度、钙化时间等支架制备参数调控凝胶支架的刚度，用于模拟不同肿瘤组织微环境中细胞外基质的软硬程度，以实现不同组织来源肿瘤干细胞的体外扩增。本发明操作简单，成本低廉，性能可控，易于规模放大，是一种很好的将不同来源的肿瘤干细胞进行体外扩增的方...
科学家建立无细胞因子培养系统实现造血干细胞长期体外扩增
无细胞因子 培养系统 造血干细胞 体外扩增
2024/1/16
造血干细胞(Hematopoietic stem cells, HSCs)是一种能够自我更新的罕见的骨髓细胞群，可在移植后重建整个造血系统，是一种治疗血液疾病的细胞疗法。脐带血是移植造血干细胞的一个可靠来源，但其中造血干细胞含量较少，体外扩增的程度有限，成功植入和持久的造血重建难度较大。因此，进一步优化造血干细胞体外扩增的培养条件有助于研发更有效的血液疾病治疗方法。
中国科学院上海药物所发现体外扩增肝细胞新方法（图）
上海药物所 肝细胞 小分子化合物
2022/12/2
肝脏是哺乳动物重要的代谢器官。肝脏在生理稳态过程中通过缓慢的增殖维持自我更新，但在受到损伤后具有很强的再生能力。研究表明，在2/3肝切除后，小鼠肝脏能在一周内恢复至原先大小。与体内的增殖能力不同，成体肝细胞在体外难以进行培养和扩增。虽然2022年12月2日的一些研究发现，利用小分子化合物和细胞因子等可以实现肝细胞在体外的长期扩增，但这些培养方法较为复杂，且长期体外培养的肝细胞往往功能受损。
2015年5月15日，学术期刊Cell Research 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所胡苹研究组和王红艳研究组合作研究的最新论文：Combination of inflammation-related cytokines promotes long-term muscle stem cell expansion。这一研究发现四种促炎因子IL-1α、 IL-13、...
人天然CD4+CD25+调节性T细胞的体外扩增培养及鉴定
体外扩增 表型标志 免疫抑制
2014/9/1
建立有效的体外培养扩增人天然CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)的体系，并检测扩增细胞的表型及体外免疫抑制功能，为Treg应用于临床免疫治疗提供实验基础。方法：免疫磁珠分离(MACS)方法从人外周血单个核细胞中分离CD4+CD25+Treg，加入抗CD3/CD28包被磁珠刺激扩增；用台盼蓝染色法测定新鲜分选的和扩增的Treg的数量和活性，用流式细胞法检测新...
多发性硬化抗原特异性CD4＋CD25＋调节性T细胞的体外扩增及其功能效应
多发性硬化 T淋巴细胞 调节性 体外培养
2014/4/23
针对多发性硬化(MS)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的免疫功能缺陷，尝试利用体外培养法获取功能正常的Treg。方法 密度梯度离心法获得MS患者(n=5)和健康对照者(n=5)外周血单个核细胞(PBMC)，免疫磁珠法分选B细胞和CD4+CD25-初始T细胞，前者进一步经可溶性CD40配体(sCD40L)刺激活化后作为抗原提呈细胞(APC)，与后者混合体外共培养，并以髓鞘碱性蛋白(MB...
研究阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患儿骨髓CD34+CD59+细胞的分离、纯化及体外扩增的条件，并对扩增后细胞的长期造血能力进行评估，为探索PNH患儿新的治疗途径提供实验依据。方法：采用磁珠-流式细胞仪二步分选法，从PNH患儿骨髓中分选出CD34+CD59+细胞，在不同细胞因子组合条件下进行体外扩增，并培养集落形成细胞（CFCs）及长期培养始动细胞（LTC-IC）。结果：体外扩增最适宜的细胞因...
观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响，并初步探讨其作用机制。方法：采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC），用IL-2+IL-15 联合培养方案进行培养，观察培养15 d后...
构建SDF-1、HOXB4和 SDF-1/HOXB4融合基因腺病毒表达载体，转染体外培养的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs），比较其对CD34+细胞体外扩增及干性维持的影响。 方法 全基因合成SDF-1/HOXB4基因序列，以其为模板，经PCR、酶切及测序鉴定，构建表达SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4的3种腺病毒载体，转染至29...
比较脐血CD34+细胞体外扩增前后生物学特征及HOXB4基因表达的变化。方法 分离新鲜人脐血单个核细胞(MNC),应用免疫磁珠分选系统(MiniMACS)分选CD34+细胞，在含细胞因子组合FL+SCF+TPO+IL-3的IMDM+10%FBS培养基中体外培养2周，分别于培养第0、7、14天计数有核细胞(nucleated cells，NC)数，流式细胞仪分析CD34+细胞比例，RT-PCR检测H...
通过对4种NK细胞体外培养方案扩增后产物的细胞免疫表型、扩增倍数以及杀伤活性进行比较，确定一种高效的NK细胞体外扩增方案。 方法: 建立4种NK细胞体外培养方案：方案1为经典的NK细胞体外扩增方案(IL-2+IL-15)；方案2为IL-2+IL-15+IL-18；方案3为IL-2+IL-15+IL-7；方案4为新型NK培养基（IL-2+OKT3）。收集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012...
探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤。 方法： 收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例，健康供者（对照组）外周血10例。NK细胞培养采用细胞因子（IL-2+IL-12+IL-15+IL-18）组合，流式细胞术检测NK细胞免疫表型及其受体（CD56+、CD69+、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、CD158b、CD159a）的表达，LDH法检测不同效靶比时...
体外扩增肾癌患者自体NK细胞及其对人肾细胞癌786-O细胞的杀伤
自然杀伤细胞 基因修饰的K562细胞 IL-2 自体 扩增
2014/3/24
探究IL-15、4-1BBL基因修饰的人白血病K562细胞（modi-K562细胞）联合IL-2体外高效扩增肾细胞癌患者自体自然杀伤（natural killer，NK）细胞的方法，研究扩增前后NK细胞对肾癌细胞株786-O的杀伤作用。方法：10例肾癌患者的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）与modi-K562细胞在含不同浓度IL-2培...
建立CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞的方案，研究扩增后NK细胞对肺癌细胞的杀伤活性。方法：分离健康人外周血单个核细胞，经免疫磁珠阴性分选获取CD3-CD56+NK细胞，将NK细胞分成对照组、IL-2组、IL-2+CD137单抗组、IL-2+IL-15组、IL-2+CD137单抗+IL-15组进行培养，经锥虫蓝染色法计算NK细胞的扩增倍数，流式细胞术检测NK细胞的表型，LDH酶释放法...