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2024年4月10日,中国科学院微生物研究所刘宏伟团队与中国医学科学院药物研究所戴均贵团队合作在Journal of the American Chemical Society上发表论文,题为Targeted Discovery of Glycosylated Natural Products by Tailoring Enzyme-Guided Genome Mining and MS-Base...
天津工业生物所在构建植物UDP-糖基转移酶数据库方面取得新进展(图)
植物UDP 糖基转移酶 分子识别
2023/7/7
糖基化作为生命体最重要的后修饰作用之一,可以极大提高糖基底物的生物活性,广泛应用于新药研发、分子识别、细胞定位、增强抗逆性等方面。植物UDP-糖基转移酶(UGT)是催化植物天然产物糖基化修饰的关键酶,能够赋予植物天然产物独特的生理活性,以及重要的药用价值。然而,目前相关数据库收录的UGT序列尚未满足日益增长的科研与应用需求,对UGT的功能性鉴定和底物识别机制研究也只是冰山一角。
黄酮类糖苷是一类具有多种生物活性的化合物。化学法合成特定糖苷反应需要多步的保护与去保护步骤,合成途径较为繁琐。利用糖基转移酶进行糖基化反应,具有合成步骤少、反应条件温和等特点,但对于含有多羟基的黄酮类化合物,目前筛选到的糖基转移酶常获得不同比例的混合糖苷,如何控制糖基转移酶的区域选择性,获得单一糖苷产物是本领域研究的关键问题。
中国科学院深圳先进技术研究院建立高效解析植物糖基转移酶功能的方法(图)
高效解析 植物糖基转移酶 功能
2022/8/30
中国科学院天津工业生物技术研究所孙媛霞研究员带领的功能糖与天然活性物质研究团队,与Reetz大师工作室团队(孙周通研究员为执行主任)合作,前期从罗汉果中分离鉴定了糖基转移酶UGT74AC2,能够催化黄酮类化合物水飞蓟宾并生成3-O-葡萄糖苷、7-O-葡萄糖苷以及3,7-O-双葡萄糖苷混合产物(产物比例22%:39%:39%)。为进一步提高该酶催化区域选择性,研究团队采用聚焦理性迭代定点诱变策略(F...
中国科学院天津工业生物技术研究所功能糖与天然活性物质研究团队,在前期挖掘表征了多个植物来源糖基转移酶的基础上,对UGT74AC1糖基转移酶进行了分子改造,获得了一系列突变体,使得该酶对不同种类三萜类化合物的催化效率提高100到10000倍,随后利用优势突变体的体外催化功能合成了一系列新的三萜皂苷化合物。团队进一步与结构生物学与蛋白酶学研究团队合作,开展了该酶的晶体结构解析与分子动力学模拟研究,揭示...
目的 克隆霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因,并进行生物信息学、密码子偏性分析。方法 根据霍山石斛转录组数据获得的IRX9基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术得到IRX9基因cDNA的全长序列,并进行生物信息学分析。结果 霍山石斛IRX9基因全长1 553 bp,包含一个长度为1 047 bp的开放阅读框,编码348个氨基酸,理论相对分子质量为39 350,等电点为7.26,...
2019年1月8日,北京大学化学与分子工程学院、北大-清华生命科学联合中心陈兴教授课题组在Nature Chemical Biology杂志在线发表了题为“Legionella effector SetA as a general O-glucosyltransferase for eukaryotic proteins”(DOI: 10.1038/s41589-018-0189-y)的研究论文,...
第11届糖基转移酶国际研讨会在青岛顺利召开(图)
第11届 糖基转移酶 国际研讨会 青岛
2018/7/12
2018年6月19日至22日,第11届糖基转移酶国际研讨会“The 11th International Symposium on Glycosyltransferases, GlycoT 2018”在青岛召开。本届会议由中国海洋大学与复旦大学联合主办,吸引了来自美国、英国、加拿大、葡萄牙、韩国、日本、中国台湾等12个国家和地区350余名糖科学研究领域的专家学者参加,是迄今为止规模最大的一次糖基转...
本研究将酿酒酵母穿梭质粒p ESC-Leu的诱导型启动子GAL1和GAL10分别替换为PGK1和TEF1启动子,构建了组成型双启动子表达载体p ESCD,再将甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的编码基因亚克隆到p ESCD的Sal I和Xho I酶切位点之间,构建了组成型表达UGT76G1的重组质粒p ESCD-UGT。将p ESCD-UGT转化到酿酒酵母YPH499中进行表达,结果确定该重组酵母在S...
β-环糊精葡萄糖基转移酶突变基因的表达及突变酶酶学性质分析
β-环糊精葡糖糖基转移酶 定点突变 环化活性 温度 p H
2016/6/30
通过对已构建的β-CGTase质粒载体采用一步PCR法进行大片段基因的定点突变,得到三个带有突变位点的质粒载体,并将其进行转化得到突变菌株。分析突变酶的酶学性质并与β-环糊精葡萄糖基转移酶比较,结果表明突变酶酶活力提高到原酶活力的1.6倍以上,且突变酶作用的最适温度60℃、最适p H6.0、在60℃下和p H5~8范围内均非常稳定,经方差分析突变酶与原酶的酶学性质差异不显著(p0.05),但是酶活...
探讨α-环糊精糖基转移酶 (CGT酶) 活性区域-3亚位点 (47位赖氨酸残基),-7亚位点 (146~152位氨基酸残基) 以及环化中心位点 (195位酪氨酸残基) 对其催化底物形成γ-环糊精 (CD) 能力的影响。将α-CGT酶相应位点分别进行如下突变:K47T,Y195I,以及146~152位氨基酸残基替换为异亮氨酸 (命名为△6),并在大肠杆菌BL21中实现异源活性表达。以可溶性淀粉作为底...