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本发明公开了一种草莓斑驳病毒感染的草莓叶片样本的保存方法,是将草莓斑驳病毒感染的新鲜草莓叶片样本在CaO干燥条件下保存。研究结果表明,CaO干燥草莓叶片是最理想的方法,PCR扩增SMoV效果最好。长距离的野外采样时可采用CaO干燥保存样品,这样可在不影响调查的情况下提高保存效果并降低保存成本。
本发明公开了草莓斑驳病毒荧光定量检测的引物及方法。该引物组,由序列表中序列1所示的核苷酸和序列表中序列2所示的核苷酸组成。本发明的引物组合物,具有灵敏度高、速度快、特异性强、简便、安全等特点。SMoV荧光定量体系灵敏度大于常规RT?PCR检,可以用于草莓病毒检测。
2018-2019年,在新疆喀什地区调查时发现部分种植的辣椒植株上心叶发黄皱缩、卷曲,个别植株叶片呈现斑驳花叶状。为了明确引起新疆喀什辣椒病毒病的病毒种类,提取典型症状样品的总RNA,反转录得到cDNA,分别用辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病毒特异性引物进行RT-PCR检测,CMV和PMMoV特异引物分别扩增得到约735,472 bp的特异条带,阴性对照未扩增目的条带,核苷酸序列比对发现,分别与韩国西葫...
辣椒轻斑驳病毒Pepper mild mottle virus (PMMoV)属于烟草花叶病毒属, 是辣椒上重要的病原病毒之一, 近年来PMMoV对辽宁部分辣椒产区造成严重危害。本文采用DAS-ELISA检测以及RT-PCR的方法首次从辽宁省凤城市蔬菜产区辣椒病叶中检测出PMMoV, 暂命名为PMMoV-FC。设计3对特异性引物对其进行扩增并测序后得到该病毒分离物全基因序列。将PMMoV-FC的全...
采自湖南地区的辣椒轻斑驳病毒Pepper mild mottle virus (PMMoV)样品经单斑分离后, 根据已经报道的PMMoV序列基因保守区设计6对简并引物, 采用片段重叠法和RACE方法扩增、克隆获得一个全长为6 356 bp的湖南分离物(PMMoV-HN1, 登录号:KP345899)全基因组序列, 编码4个蛋白, 分别为126 kD蛋白(70~3 423 nt)、183 kD蛋白(...
本研究利用RT-PCR技术对我国部分地区鲜食辣椒和辣椒加工品中的辣椒轻斑驳病毒Pepper mild mottle virus (PMMoV)进行了调查。其中, 鲜食辣椒样品(249份)中PMMoV检出率为75.5%; 147份辣椒加工品中有97份检测到PMMoV, 且所采集的每一类别的辣椒制品中都有阳性样品。调查结果表明:PMMoV不仅广泛分布于我国辣椒种植区, 而且在多种辣椒加工品中的检出率也...
菜豆荚斑驳病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为了能在现场快速检测出该病毒,将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金层析方法快速简便、直观的优点结合起来,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测方法。该方法是用生物素标记上一个引物,用荧光素(或地高辛)标记上另一个引物,通过PCR扩增产生双标记的扩增产物。将兔抗生物素多克隆抗体与20~30 nm大小的胶体金颗粒结合上并固定在释放垫上,同时在硝酸纤维素层析膜上点...
【目的】明确草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)的分子变异特点;探索利用嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV的方法。【方法】利用RT-PCR扩增SMoV 3′非编码区(non-coding region,NCR)和大外壳蛋白(large coat protein,LCP)基因特异片段,并对扩增产物进行克隆测序。利用生物信息学软件分析不同地区分离物变异特点及系统发...
【目的】鉴定侵染鬼针草引起花叶或斑驳的病原。【方法】利用电镜技术观测病原粒子;间接ELISA方法鉴定病原与马铃薯Y病毒病毒的血清学关系;分子生物学技术克隆了病原3′-端序列;BLAST,Clustal_X,BioEdit和MEGA 4.0等生物信息学软件用于所得序列的序列分析。【结果】在电镜下可观察到长约650-700 nm×13 nm左右的线状病毒粒子和风轮状内含体;利用Potyvirus P...
从表现为叶斑驳、花碎色症状的香石竹病株上获得一病毒分离物,经电镜负染观察,该病毒为直径是28~33 nm的球状粒子,病毒提取液经紫外光测定呈典型核蛋白吸收曲线,OD260/OD280=1.70;血清学反应与CarMV抗血清出现明显的沉淀线。由此,可基本认为该病毒分离物为香石竹斑驳病毒(Carnation mottle virus, CarMV)。
专著信息 书名 应用多重RT-PCR检测草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒 语种 中文 撰写或编译 作者 张志宏,杨洪一,代红艳,李贺,肖敏 第一作者单位 出版社 园艺学报,2006年6月 出版地 出版日期 2006年 6月 日 标准书号 介质类型 页数 字数 开本 相关项目 草莓病毒分子检测及病毒基因组分析的研究
专著信息 书名 利用内标为基础的RT-PCR技术检测草莓斑驳病毒 语种 中文 撰写或编译 作者 杨洪一,张志宏,杜国栋,代红艳,高秀岩 第一作者单位 出版社 植物病理学报,35(2):116~122,2005年3月 出版地 出版日期 2005年 3月 日 标准书号 介质类型 页数 字数 开本 相关项目 草莓病毒分子检测及病毒基因组分析的研究

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