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中国科学院亚热带农业生态研究所靶向MyD88调控肠道氧化应激的研究取得新进展（图）
靶向MyD88 肠道 氧化 应激
2021/12/13
近期，中国科学院亚热带农业生态研究所畜禽健康养殖与农牧复合生态研究中心印遇龙院士团队开展了深入研究，通过构建多种基因编辑技术平台，筛选出氧化应激调控关键基因，在缓解仔猪肠道氧化应激方面取得重要进展。
旨在研究痛风雏鹅的肠道菌群对肾损伤的影响及作用机制。本研究选取具有典型痛风特征的雏鹅15只，相同日龄及生长环境下的健康雏鹅15只，利用16S rDNA测序技术分析盲肠内容物中菌群的差异；用改良苦味酸法测定血清肌酐（Cr），用酶比色法测定血清尿酸（UA），用脲酶-谷氨酸脱氢酶法测定血清尿素氮（BUN）；用RT-qPCR和Western blot法测定肾组织Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（...
观察乌司他丁对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠保护作用及对TLR4 / MyD88 /NF-κB信号通路的影响。方法：将48只12〜15周龄的SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组，模型组尾部静脉注射0.5mL的脂多糖（LPS）（5mg / kg）建立急性肺损伤（ALI）模型，给予等体积的生理盐水，地塞米松（DXM）干预组和乌司他丁（UTI）干预组则在LPS注射前24h和10min时分别...
观察DHA对七氟烷诱导的小胶质细胞TLR4/MyD88/NFκB信号通路激活及炎症介质释放的影响。方法： N9小鼠小胶质细胞分为Con组、Sevo组和DHA+Sevo组，药物处理各组细胞24h后，采用MTT方法检测小胶质细胞存活率，采用western blot方法检测小胶质细胞TLR4、MyD88和IκB-α的表达量，检测各组培养基中炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的含量。
研究在无镁液所致自发性癫痫样放电海马组织中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、IL-1β和IL-6的表达，探讨TLR4介导的炎症反应在癫痫发病中的作用。方法 取新生6~9 d SD鼠的海马，体外培养至7 d时用无Mg2+ ACSF灌流3 h，于造模前和造模后1 d、3 d、1 w，采用real-time PCR检测TLR4、MyD88、IL-1β、IL-6基因，采用Wes...
为理解髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)基因的生物学特性以及对细菌胁迫的响应，本研究克隆了厚壳贻贝MyD88基因(命名为McMyD88-4)cDNA全长序列，其全长3 930 bp，开放阅读框2 607 bp，编码868个氨基酸。其中，13~109位的氨基酸序列为死亡结构域(death domain，DD)，347~481位的氨基酸...
探讨硫化氢（H2S）减轻尿源性脓毒血症诱导的急性肾损伤的作用机制。方法：40只新西兰白兔随机分为对照组、假手术组、脓毒血症模型组、脓毒血症模型NaHS处理组和脓毒血症模型NaHS联合TAK-242（TLR4抑制剂）处理组，每组8只。各组分别按分组处理72 h后，采用HE染色观察兔肾组织病理学变化；使用全自动生化分析仪检测血尿素氮（BUN）和血清肌酐（SCr）水平；采用ELISA法检测血液中中性粒细...
目的：利用大鼠颞下颌关节炎症(temporomandibular joint inflammation,TMJI)模型,检测Toll样受体4 (Toll-like receptor 4,TLR4)及其信号通路在三叉神经节中的动态表达,探究神经系统TLR4信号通路在TMJI及疼痛反应中的作用。方法：颞下颌关节下腔注射完全弗氏佐剂法建立大鼠TMJI动物模型,应用苏木精-伊红(hematoxylin-e...
尼罗罗非鱼MyD88基因的表达及多克隆抗体制备
罗非鱼 MyD88 原核表达 多克隆抗体
2019/9/24
为体外表达尼罗罗非鱼髓样分化因子（MyD88）蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体，采用无缝克隆技术将尼罗罗非鱼MyD88基因转入pET-B2m原核表达载体，并转入大肠杆菌B21中诱导表达，将表达的MyD88蛋白经纯化后免疫大耳兔制备多克隆抗体，采用Western blot和ELISA检测抗体的特异性和效价。试验结果表明，本研究成功构建了pET-B2m-MyD88原核表达载体，诱导表达获得了48.9 k...
探讨电针曲池、足三里穴是否通过TLR4/MyD88/JNK信号通路产生脑缺血再灌注损伤的保护作用。 方法：将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及电针组，以大脑中动脉闭塞（MCAO）法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用TTC染色观察脑缺血后梗死体积；采用蛋白免疫印迹法观察缺血周边区脑组织中TLR4、MyD88的蛋白表达以及JNK的磷酸化水平。 结果：电针曲池、足三里穴可明显改善MCAO大鼠的神...
猪MyD88基因干扰重组慢病毒载体的构建、病毒包装及效果评价
猪 MyD88基因 基因沉默 慢病毒载体
2015/5/28
髓性分化因子88 (MyD88) 作为TLRs/IL-1R信号通路中重要的接头蛋白，在免疫应答和疾病防御中起重要作用，作者拟通过慢病毒介导的RNA干扰技术获得MyD88基因沉默的猪小肠上皮细胞，为致病菌引起肠道疾病机制研究提供有效模型。共构建4个靶向猪MyD88基因的shRNA表达载体和1个MyD88基因高表达载体，通过实时荧光定量PCR方法鉴定瞬时共转染293细胞中MyD88基因转录水平，筛选获...
试验选取6头猪圆环病毒2型（PCV2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗原、抗体均为阴性的30日龄断奶仔猪，无菌分离肺泡巨噬细胞（AMs），分4组进行体外培养：对照组、髓样分化因子88（MyD88）干扰组（干扰组）、PCV2感染组（PCV2组）、PCV2感染-MyD88干扰组（PCV2-干扰组）。采用小干扰RNA(siRNA)方法使MyD88基因沉默，并分别于培养后0、6、12、24和48 ...
观察扶正利肺汤对老年社区获得性肺炎患者外周血中性粒细胞Toll样受体(TLRs)2、4，髓样分化因子88(MyD88)mRNA表达及对细胞因子的调节作用和临床疗效。方法 以老年肺炎患者(中西医结合治疗组A，n=38，抗生素治疗组B，n=32)和对照者C组(n=25)作为研究对象。分离外周血中性粒细胞，提取中性粒细胞mRNA，实时定量-PCR检测各组TLR2，TLR4及MyD88 mRNA表达;采用...
探讨TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用。 方法 体外实验采用ELISA法检测CpG-c41对TLR7激动剂ssRNA83刺激RAW264.7细胞24 h诱发的炎症介质TNF-α和IL-6表达的影响，Western blot检测CpG-c41对TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα蛋白表达的影响；体内实验采用ELISA法检...