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靶向cripto siRNA转染对裸鼠实验性大肠癌细胞肝转移的影响
大肠肿瘤 肝转移 畸胎瘤衍生生长因子-1
2010/10/15
目的 研究cripto基因对人大肠癌细胞迁移、侵袭和肝转移的影响。方法 以cripto基因mRNA小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测cripto基因mRNA和蛋白水平,以划痕试验方法评测癌细胞迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。以脾切除法建立裸鼠大肠癌肝转...
目的: 通过逆转录病毒载体转染Foxp3基因到小鼠CD4+CD25-T细胞,以研究体外诱导获得的调节性T细胞对NK细胞免疫活性的调节作用及其机制。方法: 携带Foxp3基因的逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,以获得持续性高表达Foxp3的CD4+ T细胞模型。CD4+Foxp3+ T细胞与NK细胞共培养后,用[51Cr]标记的YAC-1细胞检测NK细胞的杀伤毒性。在TGF-β阻断实验中,...
目的:以葡萄球菌A蛋白-多聚赖氨酸交联物 (SPA-PLL交联物)为“桥”,构建CD44抗体靶向的质粒导入系统,观察该导入系统能否特异 地将质粒导入细胞中并使之有效表达。方法:以免疫组织化学染色观察 大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)表面CD44受体的表达;以DNA凝胶阻滞实验测定SPA-PLL交联物 与绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-C1)结合的适宜质量比;以酶联中和抑制法测定SPA-PLL交联物...
Ad-p27mt转染重组腺病毒治疗裸鼠内人胃癌的分子机制
胃癌 人突变基因p27 细胞凋亡
2009/8/13
目的: 研究Ad-p27mt转染重组腺病毒对人胃癌细胞凋亡的作用及机制. 方法: Ad-p27mt转染重组腺病毒导入胃癌细胞株SGC-7901内; 流式细胞仪检测凋亡染色体亚二倍体峰值, 了解Ad-p27mt对人胃癌组织凋亡的作用; TUNEL法检测DNA片断, 在Ad-p27mt组和Ad-LacZ组中分析细胞的凋亡. 结果: Ad-p27mt成功转入人胃癌细胞SGC-7901内, 转化率达100...
转染VEGF165的大鼠血管内皮细胞与胰岛共移植对糖尿病大鼠的治疗作用
2009/8/10
目的: 探讨VEGF165转染大鼠血管内皮细胞诱导移植胰岛再血管化及对功能的影响. 方法: 受体糖尿病大鼠随机分为3组, 对照组于肾被膜下移植300当量(1当量相当于1个直径为150 mum的胰岛)胰岛, 转染组和内皮细胞组分别加入1×10(6)转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的血管内皮细胞和正常血管内皮细胞. 移植后监测血糖及血清胰岛素水平. 术后10 d行静脉糖耐量实验(IVGT...