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摘要 本文介绍了以α-鹅膏蕈碱和低浓度KCl为手段建立了RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ活性的细胞核转录系统进而研究了cGMP、cAMP、cAMP丁酯及cAMP硫代环磷酰二乙胺对大鼠肝细胞核中RNA聚合酶Ⅰ与Ⅱ活性的影响。结果显示cGMP可以提高RNA聚合酶Ⅰ的活性;cAMP主要提高RNA聚合酶Ⅱ的活极,而cAMP分子结构变化产生的丁酯及硫代环磷酰二乙胺衍生物可增强cAMP的这种作用,为深入研究cA...
摘要 现有结果表明64 DP(DNA结合蛋白)可能是一种急性期反应蛋白质。正常人每百毫升血清中含有约50mg的64 DP。目前,关于64 DP的生物学功能国内外尚无研究和报道。这方面的研究对阐明肿瘤及其它病理条件下血清64 DP含量增高的机制和意义有可能提供线索。 已知64 DP在体外具有和DNA结合的特性.它在体内的生理作用是否也和DNA有关呢?本实验首先分离纯化了人肝细胞染色质,用同位素标记的...
人干细胞因子受体c-Kit稳定表达细胞株的构建
人干细胞因子受体c-Kit 转染 FDC-P1细胞株 表达 增殖
2007/12/19
摘要 干细胞因子 (SCF)是一种重要的造血因子 ,其受体c Kit具有酪氨酸激酶活性 .SCF c Kit介导的细胞内信号转导在造血、肥大细胞的生成及其功能、以及生殖细胞和黑色素细胞的发育中起着关键的作用 .通过构建人c kitcDNA的pcDNA3.1真核表达载体 ,转染不表达人c kit的小鼠髓系祖细胞FDC P1.经Zeocin抗性筛选 ,PCR、RT PCR、Western印迹分析、流式...
中华稻蝗全消化道内壁显微结构观察
中华稻蝗;消化道;脊;齿;形态学
2007/12/18
本文采用扫描仪和扫描电镜对中华稻蝗消化道内壁的细微结构进行了系统观察和研究。结果表明,中华稻蝗食道内壁由纵行脊组成,前端有齿。嗉囊包括两段,前段的一个小的膨大部分,由V-形区和两侧的V-形脊组成,只在前端内壁有齿;后段为一个大的膨大部分,由柳叶脊、扇形脊和不规则脊组成,脊的上缘有齿。前肠内壁的齿主要为单生齿,除贲门瓣上齿的齿尖指向前方外,全部齿的齿尖指向后方。后肠的前端为12个幽门瓣,内壁有齿。回...
AngⅡ和PKC对心肌细胞AngⅡ 1型受体的转录调节
心肌细胞 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ 1型受体 蛋白激酶C
2007/12/18
摘要 利用体外培养的心肌细胞,观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和蛋白激酶C(PKC)在诱导AngⅡ1型受体(AT1)基因表达及蛋白质代谢中的作用.研究结果表明:AngⅡ可诱导AT1mRNA水平一过性下调,呈时间及剂量依赖性,10nmol/LAngⅡ刺激细胞6h,引起AT1mRNA水平降低幅度最大,降至对照的51.6%±9.5%,然后逐渐回升,24h恢复至对照水平.30μmol/LH-7(PKC抑制剂)...
摘要 采用凝胶阻滞实验比较分析了鸡烟碱样乙酰胆碱受体(AChR)亚基基因-275/+36片段与分化/未分化肌细胞核抽提物的相互作用.发现未分化肌细胞核内存在两种直接识别AChR启动子的结合活性,其结合反应不能被AChRα亚基基因增强子(含E盒子)竞争阻断,揭示此结合活性与MyoD家族无关,并表现为基因特异性结合;两种结合活性中一种结合活性既存在于未分化细胞,也存在于分化肌细胞,另一种结合活性...
应用痘苗病毒为载体表达人白细胞介素4的研究
人白细胞介素4(hIL-4) 表达 痘苗病毒 载体
2007/12/18
摘要 在真核细胞中表达近似于人类天然糖基化的白细胞介素4(hIL-4),为重要的研究课题。利用基因工程技术,以痘苗病毒作为载体,使之在真核细胞中表达hIL-4,为生产糖基化的hIL-4开辟新的可能途径。在痘苗病毒表达载体pJ120质粒的基础上,组建了含有hIL-4基因的pJl20/hIL-4重组质粒,该质粒以痘苗病毒的胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因为侧翼序列,中间插入痘苗病毒的P11和P25两个转录...
细胞色素c在氨基酸及二肽修饰金电极上的电化学反应
细胞色素c 促进剂 修饰电极
2007/12/18
摘要 系统地研究了细胞色素c在多种氨基酸和多肽修饰电极上的电化学反应。并对影响加速细胞色素c电化学反应的因素进行了讨论。
GDNF重组腺病毒增加MN9D细胞多巴胺合成与释放
胶质细胞源性神经营养因子 重组腺病毒 多巴胺 帕金森氏病 基因治疗
2007/12/18
摘要 有表达GDNF的重组腺病毒直接感染中脑多巴胺能神经元来源的MN9D细胞并经神经毒素MPP+处理.感染36h分别收获细胞及其培养基,用反相高效液相色谱方法测定多巴胺含量.结果显示,经GDNF重组腺病毒感染的MN9D细胞内及其培养基中的多巴胺水平分别增加50.7%和53.5%.给予神经毒素MPP+损伤后,细胞内多巴胺含量降低53.5%,但同时给予GDNF腺病毒则可抑制这种降低,并使多巴胺水平增加...
臭腹腺蝗(直翅目:锥头蝗科)消化道对食物储存、消化和吸收相适应的显微结构
2007/12/18
显微观察发现臭腹腺蝗Zonocerus variegatus(直翅目:锥头蝗科)嗉囊、中肠和后肠的肠壁结构有所不同。嗉囊为空时纵向折叠。中肠上皮层的厚度随龄期有明显变化,1龄和2龄时明显大于3龄、4龄和5龄。后肠具有帮助消化和吸收的功能。
表皮生长因子对游离细胞核特异基因体外转录的影响
表皮生长因子 C3H10T1/2Cl8 c-fos基因 CLN1基因 RNA聚合酶
2007/12/17
摘要 EGF作用于NC3H10和TC3H10细胞核,对RNA聚合酶Ⅱ有促进作用,但对RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ没有影响,此外还发现转化细胞核内的RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅱ的活性比正常细胞高1倍多。但两种细胞的RNA聚合酶Ⅱ差别不大。同时,以非放射性标记的c-fos、CLN1、CLN3探针进行点杂交,结果发现,EGF直接作用于细胞核可使c-fos、CLN1基因的转录水平提高;但是,对CLN3无影响。
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摘要 利用脑炎心肌炎病毒的内核糖体进入位点连接人TNF-αcDNA和选择基因NeoR基因,使TNF-α及NeoR基因均受控于病毒LTR启动子,将两基因同时转录至同一mRNA,从而构建成人TNF-α双顺反子逆转录病毒载体pGCEN/TNF-α.在LipofectAMINE介导下将其导入包装细胞PA317,G418筛选得单克隆,病毒滴度为106CFU/ml重组病毒分泌的细胞株.经PCR证明外源基因已整...
神经细胞核蛋白质与淀粉样前体蛋白基因启动子IL-Ⅰ反应元件相互作用研究
老年性痴呆病 白细胞介素Ⅰ 凝胶阻滞测定
2007/12/17
摘要 研究发现与IL-1诱导反应相关的APP启动子-488/-303片段,可与SH-SY5Y细胞核抽提物中的核蛋白发生结合作用,并且在IL-Ⅰ刺激前后有量的变化,IL-Ⅰ刺激后其结合作用明显加强.冷竞争实验表明,此结合作用具有特异性.同时发现APP启动子-488/-303片段中的AP-Ⅰ作用位点及SH-SY5Y细胞核抽提物中的AP-Ⅰ作用因子可能与此结合反应无关,而一个90kD蛋白质与此结合反应有...
表皮生长因子对细胞核转录活性的直接作用
表皮生长因子 核内作用及其机理
2007/12/17
摘要 表皮生长因子(EGF)对纯化的鼠胚成纤维细胞(C_3H_10T_1/2C18)胞核~3H-UTP掺入有明显的促进作用。这一作用在EGF与细胞核共同培养90min时达到高峰。该作用是EGF浓度依赖性的。EGF对β射线转化的上述细胞的纯化细胞核,亦同样有促进转录作用。本实验所用的细胞核经光镜,电子显微镜观察,细胞膜、细胞浆标志酶检测及放射性同位素示踪法鉴定,未检出有核外成份的污染。本实验结果为膜...